发明名称 |
一种胚胎显微注射siRNA完全沉默目的基因的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种胚胎显微注射siRNA完全沉默目的基因的方法,包括以下步骤;S1:将受精6h之后的卵母细胞移出,转入含有透明质酸酶的脱卵丘液中,静置1min;S2:将卵母细胞转移至显微镜下,脱去卵母细胞中的颗粒细胞,将去除颗粒细胞的卵母细胞用卵母细胞洗涤液清洗3次;S3:用注射针吸取20pl目标液体,并在显微镜下将注射针的针头刺入卵母细胞中,抽吸卵母细胞,使卵母细胞的细胞膜破坏,卵母细胞的细胞膜破坏完成后再快速注入目标液体,注射成功的标志是显微镜下可以观察到胚胎内容物扩张,即完成一个卵母细胞的注射。本发明提供的胚胎显微注射的方法,能够确保胚胎显微注射的成功率达到100%,使siRNA完全沉默目的基因。 |
申请公布号 |
CN106350542A |
申请公布日期 |
2017.01.25 |
申请号 |
CN201610717419.8 |
申请日期 |
2016.08.24 |
申请人 |
黑龙江省农业科学院畜牧研究所 |
发明人 |
郭镇华;吕蕾;赛福;杨云春;付博;刘自广;汪亮;彭福刚 |
分类号 |
C12N15/89(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/89(2006.01)I |
代理机构 |
北京高航知识产权代理有限公司 11530 |
代理人 |
赵永强 |
主权项 |
一种胚胎显微注射siRNA完全沉默目的基因的方法,其特征在于,包括以下步骤;S1:将受精6h之后的卵母细胞移出,转入含有透明质酸酶的脱卵丘液中,静置1min;S2:将卵母细胞转移至显微镜下,脱去卵母细胞中的颗粒细胞,将去除颗粒细胞的卵母细胞用卵母细胞洗涤液清洗3次;S3:用注射针吸取20pl目标液体,并在显微镜下将注射针的针头刺入卵母细胞中,抽吸卵母细胞,使卵母细胞的细胞膜破坏,卵母细胞的细胞膜破坏完成后再快速注入目标液体,即完成一个卵母细胞的注射。 |
地址 |
150086 黑龙江省哈尔滨市南岗区学府路368号 |