发明名称 用于高通量测序的DNA文库构建方法
摘要 本发明公开了一种扩增子测序文库的构建方法,包括用多对融合引物对从待测样品获得的DNA模板进行多重PCR,回收PCR产物,得到测序文库;其中所述多对融合引物分别针对DNA模板上的不同目的片段,融合引物包含针对目的片段的特异性引物序列和测序接头序列;其中多重PCR按下述反应条件进行:95℃2min;38个循环,每个循环为95℃30s,然后从76℃到55℃和58℃之间的任意温度缓慢降温,每秒降0.1℃,待降至58℃后保持20s,然后72℃30s;72℃2min,4℃保持。本发明还公开了该文库构建方法在高通量测序检测STR基因座和亲权鉴定中的应用。
申请公布号 CN106350590A 申请公布日期 2017.01.25
申请号 CN201610807018.1 申请日期 2016.09.06
申请人 承启医学(深圳)科技有限公司 发明人 王旭;钟嘉泳;张弓;董鸣;余卓
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C40B50/06(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 北京睿派知识产权代理事务所(普通合伙) 11597 代理人 刘锋
主权项 一种扩增子测序文库的构建方法,包括用多对融合引物对从待测样品获得的DNA模板进行多重PCR,回收PCR产物,得到测序文库;其中所述多对融合引物分别针对DNA模板上的不同目的片段,每对融合引物从5'端到3'端依次包含测序接头序列和针对目的片段的特异性引物序列;其中多重PCR按下述反应条件进行:95℃2min;38个循环,每个循环为95℃30s,然后从76℃到55℃和58℃之间的任意温度缓慢降温,每秒降0.1℃,待降至目的温度后保持20s,然后72℃30s;72℃2min。
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