发明名称 一种基于微流控纸芯片技术的茶多酚含量快速检测方法
摘要 本发明提供一种基于微流控纸芯片技术的茶多酚含量快速检测方法:在微流控纸芯片上设置对称性亲水通道网络,包括中心区、环绕中心区的多条亲水通道,亲水通道的一端与中心区连通,远离中心区的一端设置反应检测区,多条亲水通道长度和宽度相等,并形成点对称;在反应检测区滴加福林酚试剂、进样,再于中心区滴加碳酸钠溶液,通过亲水通道扩散至各检测区,进行显色反应,显色1‑10min,进行茶多酚半定量检测或定量检测。本发明方法利用微流控纸芯片的对称性多通道检测阵列,进行平行显色反应和整体化的数据采集,获得反应时间高度一致的福林酚显色‑检测阵列,从而可以在显色反应过程中的任意时间点实现准确的比色测定,大大缩短了检测所需时间。
申请公布号 CN106353312A 申请公布日期 2017.01.25
申请号 CN201610880128.0 申请日期 2016.10.09
申请人 中国农业科学院茶叶研究所 发明人 郝振霞;鲁成银;刘新
分类号 G01N21/78(2006.01)I;B01L3/00(2006.01)I 主分类号 G01N21/78(2006.01)I
代理机构 杭州千克知识产权代理有限公司 33246 代理人 冷红梅
主权项 一种基于微流控纸芯片技术的茶多酚含量快速检测方法,其特征在于所述方法包括以下步骤:(1)采用区域选择性表面改性技术在纸基底上制备设置有对称性亲水通道网络的微流控纸芯片,所述微流控纸芯片由疏水区和对称性亲水通道网络组成,所述疏水区完全包围所述对称性亲水通道网络,所述对称性亲水通道网络包括中心区、环绕中心区的多条亲水通道,每条亲水通道的一端与中心区连通,远离中心区的一端设置反应检测区,所述多条亲水通道长度和宽度相等,并以中心区为对称点形成点对称;所述亲水通道为4条以上;(2)在纸芯片的各个检测区分别滴加0.5μL~3μL的福林酚试剂,自然晾干后,用于下一步检测;所述福林酚试剂为2N的福林酚母液稀释5~20倍制得;(3)分别取0.5μL~3.0μL的空白溶液、标准溶液和待测样品溶液滴加至步骤(2)的纸芯片的不同检测区中,室温下放置,挥发至干,从而分别对应得到空白检测区、标准溶液检测区和待测样品检测区;所述空白溶液为去离子水;所述标准溶液为没食子酸标准物的水溶液;(4)将上述处理好的芯片水平放置,并在其中心区滴加10~50μL质量浓度7.5%的Na<sub>2</sub>CO<sub>3</sub>水溶液,使其在纸纤维毛细管作用力的作用下通过亲水通道自然流动扩散至各检测区,进行显色反应,显色1‑10min,进行茶多酚半定量检测或定量检测;所述半定量检测为:通过肉眼观察并对比待测样品区与标准溶液检测区的颜色强度差异,判断待测样品溶液茶多酚含量大致范围,实现待测样品溶液中茶多酚含量的半定量检测;所述定量检测为:对显色后的芯片进行整体图片采集,通过图像处理软件分析获得各检测区的颜色强度数据;将标准溶液检测区和待测样品检测区的颜色强度分别扣除空白检测区的颜色强度,依次得到各个标准溶液的颜色强度和待测样品溶液的颜色强度;以标准溶液中没食子酸浓度为横坐标、相应检测区颜色强度为纵坐标,绘制工作曲线并拟和得到标准曲线方程;由标准曲线方程和待测样品的颜色强度数据,计算得到待测样品溶液中的多酚总量。
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