一种泾阳链霉菌可湿性粉剂及其制备方法

摘要

本发明提供一种泾阳链霉菌可湿性粉剂的制备方法，利用高岭土做为载体，以沼泽红假单胞菌，玉米淀粉与豆粕粉做为营养剂发酵而成的高浓度泾阳链霉菌菌粉，按泾阳链霉菌发酵菌粉90‑95份；润湿剂：十二烷基苯磺酸钠1‑4份；分散剂：茶皂素 0.2‑1份；紫外保护剂：抗坏血酸0.5‑2份，β‑糊精0.2‑1份；干燥保护剂：麦芽糖1‑4份，甘露醇0.2‑1份的比例制成一种稳定的，菌含量超过100亿CFU/g的泾阳链霉菌可湿性粉剂。

主权项

一种泾阳链霉菌可湿性粉剂，其特征在于，所述泾阳链霉菌可湿性粉剂由下列重量份组成：泾阳链霉菌发酵菌粉90‑95份；润湿剂：十二烷基苯磺酸钠1‑4份；分散剂：茶皂素 0.2‑1份；紫外保护剂：抗坏血酸0.5‑2份，β‑糊精0.2‑1份；干燥保护剂：麦芽糖1‑4份，甘露醇0.2‑1份；其具体制备方法，由以下几步骤组成：一、泾阳链霉菌发酵菌粉的制备取出菌种保藏管，用高氏一号固体培养基划平板进行复苏，30℃培养4‑5天，在平板下挑取单个菌落接种至茄子瓶中高氏一号固体培养基上，涂满整个茄子瓶，在培养箱中30℃培养4‑6天，等菌体表面有浅粉红色孢子即可，将1L无菌水将茄子瓶中的菌苔洗下，将洗下的泾阳链霉菌接种于装有350L 泾阳链霉菌液体培养基的 500L 种子发酵罐，初始 pH值为 7.2，温度为 30℃，通风 1:1，开搅拌，转速为200r/min；培养36‑48小时，待菌体变粘稠，有大量菌丝产生，即可作为泾阳链霉菌液体菌种；将泾阳链霉菌液体菌种以10%的接种量接种至固体发酵培养基中，混匀摊至发酵托盘中，固体发酵培养基的厚度为3‑5cm，28‑32℃培养2‑3天，待固体发酵培养基长出大量白色菌点，孢子含量超过105亿cfu/g，即可风干至水份含量低于4%即可；其中，所述固体发酵培养基的配比为：高岭土：玉米淀粉：豆粕粉：沼泽红假单胞菌液=100：2：2：20；其中，所述高氏一号培养基：淀粉 20g、NaCl 0.5g、KNO3 1g、KH2PO4·3H2O 0.5g、FeSO4·7H2O0.01g、MgSO4·7H2O 0.5g、琼脂 18g、水 1000ml；其中，所述泾阳链霉菌液体培养基：葡萄糖20 g/L，豆粕粉20 g/L，氯化钠5 g/L，硫酸镁0.5 g/L，碳酸钙2 g/L，pH7.2；各培养基灭菌的条件为：0.10‑0.15MPa，121℃灭菌30分钟；其中，沼泽红假单胞菌菌液的制备：取出沼泽红假单胞菌种保藏管，用沼泽红假单胞菌固体培养基划平板进行复苏，在光照培养箱中30℃培养72小时，光照强度：1000lex‑6000lex，在平板下挑取单个菌落接种50毫升沼泽红假单胞菌液体培养基中，在光照培养箱中30℃厌氧培养120小时，种子采用20%的接种量，接种至装有4L的沼泽红假单胞菌液体培养基的5L大三角瓶，在光照培养箱中30℃厌氧培养72‑96小时，检测其菌液浓度，菌含量超过30亿CFU/ml，即可作为沼泽红假单胞菌菌液；其中，所述沼泽红假单胞菌固体培养基：磷酸二氢钾1g，氯化钙0.1g，碳酸钠3g，醋酸钠1g，氯化镁0.5g，氯化铵1g，氯化钠1g，琼脂20g，pH7.5，水1000mL；其中，所述沼泽红假单胞菌液体培养基：磷酸二氢钾1g，氯化钙0.1g，碳酸氢钠2g，醋酸钠4g，氯化镁0.5g，氯化铵1g，氯化钠1g，微量元素10mL, pH7.5，水1000mL；各培养基灭菌的条件为：0.10‑0.15MPa，121℃灭菌30分钟；其中，微量元素的配制：一水硫酸锰 4 g，硼酸 2 g，二水钼酸钠0.05g，五水硫酸铜 0.005g，六水氯化钴 0.05g，水1000mL；二、将泾阳链霉菌发酵菌粉90‑95份；润湿剂：十二烷基苯磺酸钠1‑4份；分散剂：茶皂素 0.2‑1份；紫外保护剂：抗坏血酸0.5‑2份，β‑糊精0.2‑1份；干燥保护剂：麦芽糖1‑4份，甘露醇0.2‑1份；混匀并过通过气流粉碎机粉碎过400目筛，检测其泾阳链霉菌孢子含量不低于100亿cfu/g，悬浮率不低于85%，润湿时间不高于85s，水分含量低于5%，真空包装，即为泾阳链霉菌可湿性粉剂。