一种同时测定半夏中6种有机酸含量的HPLC方法

摘要

本发明涉及一种同时测定半夏中6种有机酸含量的方法，该方法包括以下步骤：(1)样品溶液制备(2)对照品溶液制备(3)高效液相色谱测定：取对照品溶液和样品溶液在以下色谱条件下进行测定分析，色谱柱为GL InterSustain‑C₁₈(4.6mm×250mm，5μm)，流动相为磷酸调节pH＝2.0的0.03mol·L^‑1(NH₄)H₂PO₄缓冲液和甲醇，体积比为97∶3，流速为0.8mL·min^‑1，柱温30℃，检测波长为210nm。在该方法条件下，半夏中草酸、甲酸、苹果酸、乙酸、柠檬酸和琥珀酸同时得到了有效分离，且方法学结果均符合分析测定要求。该方法相比以前电位滴定法测定总有机酸的含量更为明确和客观，能有效、快速的测定半夏中6种有机酸的含量，可更全面、更准确的用于半夏药材的质量控制。

主权项

一种同时测定半夏中6种有机酸含量的HPLC方法，其特征在于以下步骤：(1)样品溶液的制备：称取干燥的半夏药材粉末2.0g，精密称定，加入40mL水，称定重量，超声，300W，25kHz，提取2次，每次2h，放至室温，再称定重量，用水补足减失的重量，提取液用砂芯布什漏斗过滤，合并滤液置100mL容量瓶中，加水定容，精密量取滤液20mL于小烧杯中，滴加氨水调pH在11.5‑12范围内，每次用提取液3倍量的乙酸乙酯萃取，共萃取3次，收集碱水液，再滴加磷酸调pH在2.0‑2.5范围内，每次用碱水液3倍量的乙酸乙酯萃取，共萃取5次，收集乙酸乙酯，旋转蒸发挥干，加超纯水溶解并定容至25mL，用0.22μm滤膜滤过，取续滤液，即为样品溶液；(2)对照品溶液的制备：分别精密称取草酸、甲酸、苹果酸、乙酸、柠檬酸和琥珀酸对照品适量，加水溶解，制得含有草酸、甲酸、苹果酸、乙酸、柠檬酸和琥珀酸的混合对照品溶液；(3)高效液相色谱测定：将对照品溶液和样品溶液进行高效液相色谱测定，色谱柱为GL InterSustain‑C₁₈，流动相为磷酸调节pH为2.0的0.03mol·L^‑1(NH₄)H₂PO₄缓冲液和甲醇，体积比为97∶3，流速0.8mL·min^‑1，柱温30℃，检测波长210nm，对照品溶液和样品溶液各进样20μL，采用标准曲线法定量，色谱图记录与处理由工作站完成，理论塔板数按草酸峰计算不低于3000。