一种27个植物转基因位点复合PCR扩增荧光检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种27个植物转基因位点复合PCR扩增荧光检测试剂盒，该试剂盒包括PCR缓冲液、MgCl₂、dNTPs和牛血清蛋白的混合物，热启动快速Taq酶，27对引物混合物及超纯水。本发明只需对植物基因组DNA样本进行约80min的核酸扩增，即可检测是否存在试剂盒包含的转基因位点，适用于玉米、大豆、水稻和油菜转基因成分或品系鉴定，是一种快速、简便、经济、高效的转基因成分检测试剂盒。

主权项

一种27个植物转基因位点复合PCR扩增荧光检测试剂盒，其特征在于，包括有用于扩增如下27个转基因片断的引物：NOS、BAR、Pat、CaMV35S、FMV35S、CP4‑EPSPS、CryIAb、NPTII、GA21、Zein、MIR604、Mon88017、Mon863、TC1507、NK603、BT176、Bt11、TT51、Ms8、Lectin、Mon89788、pe3‑pepcase、Rf3、Sps、Rt73、GTS‑40‑3‑2及CV127；所述的引物序列是：NOS，SEQ ID NO.1～2；BAR，SEQ ID NO.3～4；Pat，SEQ ID NO.5～6；CaMV35S，SEQ ID NO.7～8；FMV35S，SEQ ID NO.9～10；CP4‑EPSPS，SEQ ID NO.11～12；CryIAb，SEQ ID NO.13～14；NPTII，SEQ ID NO.15～16；GA21，SEQ ID NO.17～18；Zein，SEQ ID NO.19～20；MIR604，SEQ ID NO.21～22；Mon88017，SEQ ID NO.23～24；Mon863，SEQ ID NO.25～26；TC1507，SEQ ID NO.27～28；NK603，SEQ ID NO.29～30；BT176，SEQ ID NO.31～32；Bt11，SEQ ID NO.33～34；TT51，SEQ ID NO.35～36；Ms8，SEQ ID NO.37～38；Lectin，SEQ ID NO.39～40；Mon89788，SEQ ID NO.41～42；pe3‑pepcase，SEQ ID NO.43～44；Rf3，SEQ ID NO.45～46；Sps，SEQ ID NO.47～48；Rt73，SEQ ID NO.49～50；GTS‑40‑3‑2 SEQ ID NO.51～52；CV127，SEQ ID NO.53～54；所述引物在扩增体系中的终浓度为：SEQ ID NO.1～2：0.06µM；SEQ ID NO.3～4：0.2µM； SEQ ID NO.5～6：0.24µM；SEQ ID NO.7～8：0.096µM；SEQ ID NO.9～10：0.2µM；SEQ ID NO.11～12：0.3µM；SEQ ID NO.13～14：0.064µM；SEQ ID NO.15～16：0.06µM；SEQ ID NO.17～18：0.24µM；SEQ ID NO.19～20：0.24µM；SEQ ID NO.21～22：0.064µM；SEQ ID NO.23～24：0.18µM； SEQ ID NO.25～26：0.22µM；SEQ ID NO.27～28：0.18µM；SEQ ID NO.29～30：0.18µM；SEQ ID NO.31～32：0.033µM；SEQ ID NO.33～34：0.2µM；SEQ ID NO.35～36：0.15µM；SEQ ID NO.37～38：0.05µM；SEQ ID NO.39～40：0.3µM；SEQ ID NO.41～42：0.24µM；SEQ ID NO.43～44：0.25µM； SEQ ID NO.45～46：0.26µM；SEQ ID NO.47～48：0.24µM；SEQ ID NO.49～50：0.07µM；SEQ ID NO.51～52：0.2µM；SEQ ID NO.53～54：0.3µM。