一种通过芍药叶片诱导愈伤组织分化的培养基及培养方法

摘要

本发明涉及一种通过芍药叶片诱导愈伤组织分化的培养基和培养方法，该方法是在3月下旬选取幼嫩的芍药叶片；叶片灭菌处理后接种于诱导培养基，温度25±2℃，暗培养2个月诱导形成愈伤组织，再将愈伤组织转至分化培养基，温度25±2℃，光照时间12h·d^‑1，光照强度1200±100lx，培养2个月获得不定芽。本发明可以使芍药叶片的愈伤诱导率高达98.60％，玻璃化率为0％，不定芽分化率可达58.99％，每个愈伤组织块可形成4‑10个不定芽，解决了以芍药叶片为外植体诱导愈伤组织、分化不定芽比率低的技术难题，为芍药基因工程的开展提供了技术支撑，市场前景广阔。

主权项

一种通过芍药叶片诱导愈伤组织分化的培养基，包括诱导培养基和分化培养基，其特征在于，所述诱导培养基为：改良1/2MS基本培养基，添加TDZ0.1～2.0mg·L^‑1+椰汁5～15％，附加蔗糖30g·L^‑1，琼脂6.4g·L^‑1，pH为5.8；所述分化培养基为：改良1/2MS基本培养基，添加TDZ0.5～3.0mg·L^‑1+椰汁5～15％，附加蔗糖30g·L^‑1，琼脂6.4g·L^‑1，水解酪蛋白600mg·L^‑1，活性炭1g·L^‑1，pH为5.8；所述改良1/2MS基本培养基成分为：大量元素：KNO₃ 125mg/L，NH₄NO₃ 250mg/L，KH₂PO₄ 275mg/L，MgSO₄·7H₂O 125mg/L，Ca(NO₃)₂·4H2O 250mg/L；微量元素：KI 0.83mg/L，H₃BO₃ 6.2mg/L，MnSO₄·4H₂O 22.3mg/L，ZnSO₄·7H₂O 8.6mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.25mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.025mg/L，CoCl₂·6H₂O 0.025mg/L；铁盐：Na₂·EDTA 37.3mg/L，FeSO₄·7H₂O 27.8mg/L；有机成分：肌醇100mg/L，甘氨酸2mg/L，盐酸硫胺素0.1mg/L，盐酸吡哆醇0.5mg/L，烟酸0.5mg/L，蔗糖30g/L，琼脂6.4g/L。