发明名称 |
一种提高鸭黄病毒病毒滴度的培养方法 |
摘要 |
本发明公开了一种提高鸭黄病毒病毒滴度的培养方法,属于微生物病毒技术领域,主要包括以下步骤:配制DMEM培养液、加入胎牛血清后接种细胞进行单层培养、加入亲和剂及DMEM培养液后继续培养1min~30min、接种鸭黄病毒2~5天,即可收获具有较高病毒滴度的鸭黄病毒液。本发明所述的培养方法主要通过改变鸭黄病毒与细胞间的微环境,增加病毒与细胞接触亲和度,从而大大提高鸭黄病毒病毒滴度。 |
申请公布号 |
CN104560892B |
申请公布日期 |
2017.01.18 |
申请号 |
CN201510050831.4 |
申请日期 |
2015.01.31 |
申请人 |
广东海大畜牧兽医研究院有限公司;四川海林格生物制药有限公司 |
发明人 |
冯晓声;王贵平;贾爱卿;王伟 |
分类号 |
C12N7/00(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N |
主分类号 |
C12N7/00(2006.01)I |
代理机构 |
广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 |
代理人 |
罗伟添 |
主权项 |
一种提高鸭黄病毒病毒滴度的培养方法,其特征在于:其包括以下步骤:A、DMEM培养液的配制:将DMEM干粉溶于去离子水中,搅拌至完全溶解后,调节pH值至6.8~7.8,并用≤0.22μm的无菌滤膜进行除菌过滤,置于≤4℃的冰箱待用;B、往上述的DMEM溶液中加入占DMEM培养液体积1%~8%的胎牛血清后,接种细胞进行单层培养;C、待单层细胞培养好后,弃去培养容器内的DMEM培养液,并用无菌洗液洗;D、弃去无菌洗液,然后往培养容器内加入亲和剂和步骤A所述的DMEM培养液,其中亲和剂的体积用量为DMEM培养液体积用量的0.01%~1%;E、将培养容器置于细胞培养箱中静置培养1min~30min后,接种鸭黄病毒,混合均匀后置于细胞培养箱中培养2~5天,收获病毒液;其中,步骤D中所述的亲和剂由以下按质量百分数计的各组分制备而成:丙二酸 0.5~0.8%; 磷酸 0.5~1%;山梨酸 0.2~0.5%; 苹果酸 0.4~0.5%;无机盐 2.5~2.9%; 去离子水 余量。 |
地址 |
511490 广东省广州市番禺区沙头街福平路八街5号(仅限办公用途) |