发明名称 一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选方法
摘要 本发明涉及一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选方法,包括如下步骤:将包含6个串联重复TCF4转录因子的7TFP质粒采用慢病毒转移的方式转染宿主细胞形成稳定细胞株,并种植于96孔培养板,过夜贴壁后更换培养基,并加入待测样品,取出上述培养板,加入细胞裂解液,取上清液,测定药物处理前后细胞的荧光素酶基因表达强度,荧光素酶基因增强,即说明待测样品为筛选的得到的组蛋白去乙酰化酶抑制剂。本发明可以有效的准确的检测出组蛋白去乙酰化酶抑制剂,解决了假阴性和假阳性的问题,降低了成本,具有简单,高效、低成本的特点。
申请公布号 CN104388538B 申请公布日期 2017.01.18
申请号 CN201410672070.1 申请日期 2014.11.18
申请人 中国人民解放军第三军医大学 发明人 章波;庞学利;黄钢;何刚;徐小峰;宋敏
分类号 C12Q1/66(2006.01)I;C12Q1/34(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I 主分类号 C12Q1/66(2006.01)I
代理机构 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 代理人 汤东凤
主权项 一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂的鉴定方法,其特征在于,包括如下步骤:1)将质粒转染宿主细胞形成稳定细胞株;所述的质粒为7TFP质粒,包含6个串联重复TCF4转录因子,所述的质粒转染采用慢病毒转移的方式;所述的宿主细胞为结肠癌细胞HCT116、细胞HEK293或SW480;2)将获得的细胞株种植于96孔培养板,过夜贴壁后更换培养基,并加入待测样品;3)取出上述培养板,加入细胞裂解液,取上清液,测定药物处理前后细胞的荧光素酶基因表达强度,荧光素酶基因增强,即说明待测样品为鉴定得到的组蛋白去乙酰化酶抑制剂。
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