一种具有抗肿瘤活性的核桃多肽‑锌螯合物的制备方法

摘要

本发明公开了一种具有抗肿瘤活性的核桃多肽‑锌螯合物的制备方法，该方法包括以下步骤：（1）限制性酶解；（2）超滤膜分离；（3）浓缩、喷雾干燥，得到核桃多肽；（4）在核桃多肽溶液中加入锌源进行螯合反应；（5）将螯合液进行透析；（6）冷冻干燥，得核桃多肽‑锌螯合物。产品在偏酸性条件下溶解为淡黄色液体。本发明所研制的核桃多肽‑锌螯合物，通过细胞实验证明该螯合物具有明显的抗肿瘤生理活性，有望成为治疗癌症尤其是肝癌的高效低毒药剂。

主权项

一种具有抗肿瘤活性的核桃多肽‑锌螯合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（1）限制性酶解：将核桃粕，与水混合，加入占核桃粕蛋白质量 0.5~1.5 %的蛋白酶，在55~60℃酶解；沸水中10~30 min灭酶，离心，取上清液，抽滤，得到核桃粕蛋白多肽；所述核桃粕与水的质量比为 1:7~1:9；所述蛋白酶为木瓜蛋白酶；所述酶解的时间为12~16 h；（2）超滤膜分离：利用超滤膜对核桃粕蛋白多肽进行分离纯化；超滤膜截留分子量范围为 3 kDa；超滤后收集分子量 < 3kDa 的滤过组分；（3）浓缩、喷雾干燥：收集超滤后的酶解液于 55~65℃真空旋转蒸发浓缩，所得产物经喷雾干燥制得核桃多肽；（4）在锌溶液中加入核桃多肽进行螯合反应：将ZnCl₂溶于蒸馏水配成ZnCl₂溶液，加入多肽溶液后置于漩涡仪混匀，在 50~55℃下震荡反应 20~24 h；（5）将螯合液进行透析：螯合反应结束后，用透析袋于 4~10 ℃对溶液进行透析；（6）冷冻干燥，得核桃多肽‑锌螯合物：对透析后的螯合液冷冻干燥，得到核桃多肽‑锌螯合物。