发明名称 一种白芨的组织培养繁育方法
摘要 本发明公开了一种白芨的组织培养繁育方法,包括准备两组培养基、无菌苗的获得、继代培养、壮苗和生根。
申请公布号 CN103828715B 申请公布日期 2017.01.18
申请号 CN201310632169.4 申请日期 2013.11.29
申请人 安徽中升生物科技有限公司 发明人 谢成卓
分类号 A01H4/00(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 安徽合肥华信知识产权代理有限公司 34112 代理人 余成俊
主权项 一种白芨的组织培养繁育方法,其特征在于:包括以下步骤: (1)准备两组培养基: 第一组为培养初期诱导分生组织和增殖同步培养基(A):1/2MS+6‑BA1.0‑2.0mg/L+NAA0.3‑.5mg/L,外加食糖20‑30g/L,琼脂7.5g/ L,香蕉80‑100g/L,pH5.5‑5.8; 第二组为培养后期壮苗和生根同步培养基(B):MS+NAA1.0‑2.0mg/L+IBA0.3‑0.5mg/L,外加食糖30g/L,琼脂7.5g/L,香蕉100g‑120g/L,苹果20‑25g/L,胡萝卜20‑25g/L,pH5.5‑5.8,温度24‑28℃; (2)无菌苗的获得: 以野生白芨蒴果为外植体,当蒴果外表刚转为褐色,达到形态成熟而尚未开裂时采收,带入实验室用洗衣粉液清洗1min,漂洗干净后,在超净工作台中用0.1%的HgCl,消毒20‑25min,无菌水冲洗3‑4次,每次2min,随后将所得灭菌后的果荚用刀片切开,把白芨种子均匀播撒在培养基(A)上,70d后分化为白芨小苗; (3)继代培养: 把上述获得的白芨小苗继续转接在培养基(A)上,100d可发育成1.0‑1.5cm高的小苗,每隔40‑50d继代1次,得丛生苗; (4)壮苗和生根: 将小于3cm的丛生苗转接在培养基(A)上继续增殖培养,依次循环;高于3cm的丛生苗转入培养基(B)上进行生根培养,每穴1株, 60d后,当苗高5‑8cm、根长4‑6cm,即可出瓶炼苗栽培; 所述的继代培养每次可增殖2‑6倍。
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