发明名称 一种从鸡血中提取抗菌肽的方法
摘要 本发明公开了一种从鸡血中提取抗菌肽的方法。该方法包括如下步骤:(1)取鸡血,进行血细胞破碎后加入木瓜蛋白酶进行酶解;(2)向酶解液中加入乙酸浸提,离心取上清,调节pH至6.0±0.5,获得鸡血抗菌肽粗提物。实验证明,利用本发明的方法从鸡血中提取的抗菌肽对大肠杆菌、嗜水气单胞菌、绿脓杆菌等常见的致病菌有明显的抑制作用。本发明为生产抗菌肽提供了一个新的途径和方法。本发明方法具有操作方便快捷、设备简单、分离提取率高、成本低的优点,可应用于大规模地从新鲜鸡血中分离纯化抗菌肽的生产。
申请公布号 CN104164467B 申请公布日期 2017.01.11
申请号 CN201410389532.9 申请日期 2014.08.08
申请人 中国农业大学 发明人 佘锐萍;胡凤姣;吴桥兴
分类号 C12P21/06(2006.01)I;A61K38/01(2006.01)I;A61P31/04(2006.01)I;A23K20/147(2016.01)I 主分类号 C12P21/06(2006.01)I
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人 关畅
主权项 一种从鸡血中提取抗菌物质的方法,是按照如下步骤进行的:(1)取鸡血,进行血细胞破碎后加入木瓜蛋白酶进行酶解;所述木瓜蛋白酶与所述鸡血的配比为1750‑35000U:100ml;所述酶解的温度为70~90℃,时间为4~6h;(2)向酶解液中加入乙酸浸提,离心取上清,调节pH至6.0±0.5,获得鸡血抗菌物质的粗提物;所述浸提为4~37℃震荡16‑20h;所述向酶解液中加入乙酸为:向所述酶解液中加入等体积的体积百分含量为5%的乙酸水溶液;所述离心为6600~10000g 4℃离心20~30min;(3)将所述鸡血抗菌物质的粗提物上样于Sephadex G‑100凝胶柱,采用洗脱液进行洗脱,收集具有抗菌活性的洗脱峰;所述洗脱液为pH为6.0的浓度为0.2mol/L的乙酸钠水溶液;所述洗脱的速度为10.0mL/cm<sup>2</sup>·h;(4)将步骤(3)收集的具有抗菌活性的洗脱峰上样于Sephadex G‑25凝胶柱,采用洗脱液进行洗脱,收集洗脱峰,获得所述鸡血抗菌物质;所述洗脱液为pH为6.0的浓度为0.2mol/L的乙酸钠水溶液;所述洗脱的速度为10.0mL/cm<sup>2</sup>·h。
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