一组芽孢杆菌属（Bacillus）菌种检测探针

摘要

一组芽孢杆菌属（Bacillus）菌种检测探针，属于核酸检测领域。具体包括三条相互关联的寡核苷酸探针：用于特异性结合芽孢杆菌属的16S rRNA的分析探针、用于结合在载体上并与分析探针特异性结合的捕获探针以及用于与分析探针特异性结合的信号探针。分析探针具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；捕获探针具有如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列，具有生物素标记；信号探针具有如SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列，在3´端有异硫氰酸(FITC)标记。在每毫升培养液B.subtilis菌体浓度在1.33×10²‑2.13×10⁵范围内与检测信号强度线性相关，R²=0.99741，而且特异性好、灵敏度高、稳定性高、定性定量，可应用到白酒等传统发酵生产过程中芽孢杆菌属的实时监测。

主权项

一组芽孢杆菌属（Bacillus）菌种检测探针，其特征在于包括三条相互关联的寡核苷酸探针：用于特异性结合芽孢杆菌属的16S rRNA的分析探针，用于结合在载体上并与所述分析探针特异性结合的捕获探针，以及用于与所述分析探针特异性结合的信号探针；分析探针为SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列，长度为61 nt，在进行生物信息学比对分析时，该分析探针仅与Bacillus属的保守区域16S rRNA 915‑975区域核苷酸互补，而与其它属无同源性，结合双特异性核酸检测方法，能够分辨16S rRNA中探针结合部分仅差一个碱基的近缘属；捕获探针为SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列，该捕获探针特异性结合于分析探针3'端，长度为24nt，在5'端标记有生物素，并通过生物素‑链霉亲和素相互作用固定在所述载体上；信号探针为SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列，长度为26 nt，该信号探针在5´端具有分析探针互补区，与分析探针的5´端互补结合，该信号探针在3´端有异硫氰酸FITC标记。