发明名称 一种体外三维呼吸道干/祖细胞的培养方法
摘要 本发明涉及体外三维呼吸道干/祖细胞的培养方法,包括(1)将呼吸道干/祖细胞与MLg细胞均匀混合在50μl的含10%胎牛血清的HBSS缓冲液里,加入50μl Matrigel基质胶,继续混合均匀后将其加入细胞培养小室内;(2)于37℃培养箱中静置30分钟,使Matrigel基质胶凝固;(3)向细胞培养小室下方的对应孔板中加入410μl DMEM/F12培养基,将孔板置于细胞培养箱内培养,每隔一天换一次培养基,培养14天后呼吸道干/祖细胞可长成球状结构;所述培养方法在呼吸道干/祖细胞表型鉴定之前可以研究其功能与调控。
申请公布号 CN106318901A 申请公布日期 2017.01.11
申请号 CN201610702462.7 申请日期 2016.08.20
申请人 天津市海河医院 发明人 陈怀永;吴琦;孙昕;李雪;李宽;李玉;张秋阳
分类号 C12N5/074(2010.01)I 主分类号 C12N5/074(2010.01)I
代理机构 天津市三利专利商标代理有限公司 12107 代理人 李蕊
主权项 一种体外三维呼吸道干/祖细胞的培养方法,其特征在于:具体步骤如下:(1)将呼吸道干/祖细胞与MLg细胞均匀混合在50μl的含10%胎牛血清的HBSS缓冲液里,其中,呼吸道干/祖细胞的用量为1000‑10000细胞/小室,MLg细胞用量为200000细胞/小室,加入50μl Matrigel基质胶,继续混合均匀后将其加入细胞培养小室内;(2)于37℃培养箱中静置30分钟,使Matrigel基质胶凝固;(3)向细胞培养小室下方的对应孔板中加入410μl DMEM/F12培养基,将孔板置于细胞培养箱内培养,每隔一天换一次培养基,培养14天后呼吸道干/祖细胞长成球状结构。
地址 300350 天津市津南区津咸路海河医院