发明名称 一种杜鹃花化学消毒组培方法
摘要 本发明涉及一种杜鹃花化学消毒组培方法。杜鹃花的化学消毒组培方法,包括培养容器消毒、培养基配制、诱导培养、增殖培养、生根培养和瓶苗移栽。本发明的杜鹃花化学消毒组培方法,利用化学试剂达到灭菌或抑菌的目的,在配制培养基的过程中,培养容器和培养基都无需高温高压灭菌,减少了工作量和能源消耗,简化了杜鹃花组培环节;并且操作简单,只要按不同的培养基配方配制即可;实用性强,推广性好,还可以有效降低杜鹃花的组培成本,一般可降低成本10%以上。
申请公布号 CN104885942B 申请公布日期 2017.01.11
申请号 CN201510274041.4 申请日期 2015.05.26
申请人 福建农林大学 发明人 郭晋隆;林庆良;许莉萍;高世武;阙友雄
分类号 A01H4/00(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 福州市众韬专利代理事务所(普通合伙) 35220 代理人 陈智雄;黄秀婷
主权项 一种杜鹃花化学消毒组培方法,包括培养容器消毒、培养基配制、诱导培养、增殖培养、生根培养和瓶苗移栽,其特征在于:(1)培养容器消毒:将培养瓶瓶盖及接种用的不锈钢盘在100mg/L次氯酸钠+2mg/L青霉素+100mg/L丙酸钙的水溶液中浸泡不少于10h,保存备用;(2)培养基配制:诱导培养基为ER+6~15mg/L ZT+5~15mg/L IAA+40~100mg/L次氯酸钠+2~5mg/L青霉素+50~100mg/L丙酸钙+20g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉,pH5.8;增殖培养基为:ER+1~3mg/L ZT+0.5~1.0mg/L IAA+40~100mg/L次氯酸钠+2~5mg/L青霉素+50~100mg/L丙酸钙+20g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉,pH5.8;生根培养基为1/2ER+0.5~1.5mg/L NAA+0.1~0.5IBA mg/L+40~100mg/L次氯酸钠+2~5mg/L青霉素+50~100mg/L丙酸钙+20g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉,pH5.8;所述ER为1965年,Eriksson公开的ER培养基;所述ZT为玉米素;所述NAA为〆‑萘乙酸;所述IAA为吲哚乙酸;所述IBA为吲哚丁酸;配制培养基时,先称各培养基配方中蔗糖和琼脂粉,加培养基总体积1/2的自来水,加热至琼脂粉完全溶解,再按各培养基配方配齐其他原料后,定容,然后用1mol/L的NaOH或1mol/L的HCl调pH值至5.8,分装到消毒过的培养容器中,封口,冷却凝固后备用;(3)诱导培养:取健壮的杜鹃花蕾,先自来水冲洗表面灰尘,剥去外苞片,用体积比为75%酒精中浸2~3s,再用重量比为0.1%HgCl<sub>2</sub>消毒6~10min,无菌水冲洗3~5次;在超净工作台上,剥去2~3层的苞片,切除基部褐化部分,接种到诱导培养基上,40d后形成若干小芽;培养室温度为25~28℃,光照12h,光照强度为1200~1500lx;(4)增殖培养:将诱导培养的小芽转入增殖培养基中,30d后逐步诱导出丛生芽并发育成不具根的丛生芽苗;将丛生芽苗切成带芽的茎段,转接到新的增殖培养基中,每30d转接一次;培养室温度为25~28℃,光照12h,光照强度为1200~1500lx;(5)生根培养:当增殖培养的丛生芽苗长到4~6cm时,将丛生芽苗切成单株,接种到生根培养基上,25d后形成完整植株;培养室温度为25~28℃,光照12h,光照强度为1200~1500lx;(6)瓶苗移栽:将生根培养获得的完整植株取出,洗净根部的培养基,用800倍的多菌灵浸泡30min后,移栽至栽培基质中,所述栽培基质由泥碳土和珍珠岩组成,其重量比为2∶1;大棚上层用75%遮光网遮盖,移栽的环境温度为22~28℃。
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