一种分子印迹在线固相萃取与液相色谱联用检测17β‑雌二醇方法

摘要

本发明涉及一种分子印迹在线固相萃取与液相色谱联用检测17β‑雌二醇方法，先制备17β‑雌二醇分子印迹聚合物；再将分子印迹聚合物MIP填充到圆柱形不锈钢预柱中，使用高效液相色谱分析检测；绘制17β‑雌二醇标准曲线，根据标准曲线计算出待测环境水中17β‑雌二醇含量。本发明固相萃取的取吸附剂是17β‑雌二醇分子印迹聚合物，可专一识别17β‑雌二醇，具有非常高的选择性；本发明富集倍数超过490倍，大大降低液相色谱的检出限，适用于水中痕量17β‑雌二醇的吸附检测。

主权项

一种分子印迹在线固相萃取与液相色谱联用检测17β‑雌二醇方法，其特征在于步骤如下：1)17β‑雌二醇分子印迹聚合物的制备：5‑30mL氯仿溶液中加入17β‑雌二醇、γ‑氨基丙基三乙氧基硅烷，磁力搅拌5‑30min，再在混合液中加入0.1‑0.3g活化硅球以及四乙氧基硅烷溶液，搅拌10‑30min；最后加入1.0‑5.0mL浓度为0.1mol L^‑1醋酸反应5‑10min后，40‑70℃水浴孵化24h；洗脱后80℃下真空干燥10h得分子印迹聚合物MIP；2)分子印迹在线固相萃取与液相色谱联用流程：A、取100‑200mg步骤1)制备的分子印迹聚合物MIP填充到圆柱形不锈钢预柱中，与高效液相色谱的六通阀相连；B、以17β‑雌二醇溶液作为标准溶液；将100mL17β‑雌二醇标准溶液以1.5‑2.5mL min^‑1的速度通过不锈钢预柱，弃掉流出物；C、使用超纯水和色谱甲醇按照体积比2：3的混合溶液作为液相色谱的流动相；流动相以1.0mL min^‑1的流速反冲洗脱，分析物进入高效液相色谱仪，分析检测；D、分析检测后，将流动相以1.0mL min^‑1的流速反冲洗脱MIP预柱5‑10min；3)配制不同浓度的17β‑雌二醇标准溶液并重复步骤2)操作；以17β‑雌二醇标准溶液的浓度为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标，绘制17β‑雌二醇标准曲线；4)取待测环境水100mL，将待测环境水替换步骤2)中17β‑雌二醇标准溶液并按照步骤2)的流程进行检测；根据标准曲线计算出待测环境水中17β‑雌二醇含量。