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一种甘薯化学消毒组培方法，包括培养容器消毒、培养基配制、茎尖诱导培养、增殖培养、生根培养和瓶苗移栽，其特征在于：(1)培养容器消毒：将培养瓶、瓶盖及接种用的不锈钢盘在100mg/L次氯酸钠+10mg/L乳酸链球菌素+100mg/L丙酸钙的水溶液中浸泡不少于10h，保存备用；(2)培养基配制：茎尖诱导培养基为MS+0.2～0.8mg/L 6‑BA+0.1～0.5mg/L IAA+50～100mg/L次氯酸钠+1～2mg/L青霉素+10～50mg/L丙酸钙+20g/L蔗糖+3.5g/L琼脂粉，pH5.8；增殖培养基为：1/2MS+50～100mg/L次氯酸钠+1～2mg/L青霉素+10～50mg/L丙酸钙+20g/L蔗糖+3.5g/L琼脂粉，pH5.8；生根培养基为1/2MS+0.1～0.8mg/L NAA+50～100mg/L次氯酸钠+1～2mg/L青霉素+10～50mg/L丙酸钙+20g/L蔗糖+3.5g/L琼脂粉，pH5.8；所述MS为1962年，Murashige和Skoog公开的MS培养基；所述6‑BA，指6‑苄氨基嘌呤；所述NAA，指〆‑萘乙酸；所述IAA，指吲哚乙酸；配制培养基时，先称各培养基配方中蔗糖和琼脂粉，加培养基总体积1/2的自来水，加热至琼脂粉完全溶解，再按各培养基配方配齐其他原料后，定容，然后用1mol/L的NaOH或1mol/L的HCl调pH值至5.8，分装到消毒过的培养容器中，封口，冷却凝固后备用；(3)茎尖诱导培养：选取健康无病斑的薯块洗净后，用消毒湿砂覆埋于25℃黑暗催芽，当芽露出砂面后38一40℃热处理7d；剪取生长旺盛的茎尖3—5cm；在室内切去叶片，用自来水冲洗20～30min，在体积比为75％的酒精中浸泡30s，用重量比为0.1％的升汞溶液消毒8min，取出后，用无菌水冲洗3次，然后在解剖镜下剥取带1～2个叶原基、长0.2～0.3mm的茎尖，接种于茎尖诱导培养基上培养30d，获得的无菌苗；培养室温度为26℃，光照12h，光照强度为2000～3000lx；(4)增殖培养：将诱导培养获得的无菌苗切成长1.0～1.5cm、带单个腋芽的茎段，接种到增殖培养基中，培养4周成为不具根的小苗，每30d转接一次；培养室温度为26℃，光照12h，光照强度为2000～3000lx；(5)生根培养：将增殖苗切成长1.0～1.5cm、带单个腋芽的茎段，接种到生根培养基上，培养25d后成为完整植株；培养室温度为25℃，光照16h，光照强度为2000～3000lx；(6)瓶苗移栽：将生根培养获得的完整植株取出，洗净根部的培养基，用800倍的多菌灵浸泡30min后移栽至大棚的耕作土中，大棚上层用遮光网遮盖，移栽的环境温度为22～28℃。 |
