一种微生物分步固态发酵制备茶多糖的方法

摘要

本发明公开了一种微生物分步固态发酵制备茶多糖的方法，包括以下步骤：茶叶粉或茶粕粉接入菌种分步固态发酵、恒温水浸提、离心；超滤膜分离、浓缩、乙醇沉淀、离心、冷冻干燥得到茶多糖。本发明的方法与现有的水提法区别在于本发明利用微生物生长繁殖中产生的多种酶系（蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、植酸酶等）将茶叶细胞中多种大分子物质水解，有利于茶多糖的浸出，制备条件温和、工艺简单、绿色环保，茶多糖的得率大、纯度高、活性强。本发明以低档茶、粗老茶、茶粕为原料，实现了资源的高值化利用。本发明制得的茶多糖具有抗氧化、抗辐射、降血糖的功能活性，适合工业化生产。

主权项

一种微生物分步固态发酵制备茶多糖的方法，包括以下步骤：(1)茶叶粉或茶粕粉加入营养盐溶液，灭菌，接入菌种分步固态发酵，加入水恒温水浸提，离心；(2)二级超滤膜分离，真空浓缩，乙醇沉淀，离心，冷冻干燥得到茶多糖；步骤(1)中茶叶粉或茶粕粉为低档茶、粗老茶、提取茶油后的茶粕粉碎过200目筛下物，营养盐溶液1L体积所含的成分包括0.52％的(NH₄)₂SO₄、0.48％的KH₂PO₄、0.8％的尿素、1.2％的葡萄糖，茶叶粉或茶粕粉与营养盐溶液的质量与体积比为：1g:1.0ml‑1g:2.0ml，灭菌的条件为121℃灭菌15min，接入的第一种菌种为菌龄为60‑84h的米曲霉或菌龄为30‑40h的啤酒酵母，茶叶粉或茶粕粉与菌种的接入体积比为：1g:0.2ml‑1g:0.4ml，10⁸个菌种/ml，第一步发酵条件为30℃下静置发酵36h，接入的第二种菌种为菌龄为16‑24h的枯草芽孢杆菌或菌龄为9‑15h的乳酸菌，茶叶粉或茶粕粉与菌种的接入体积比为：1g:0.1ml‑1g:0.2ml，10⁸个菌种/ml，第二步发酵条件为40℃下静置发酵42h，加入水的质量是茶叶粉或茶粕粉的质量的4.5倍，恒温水浸提条件为45‑55℃恒温水浴中浸提3‑6h，离心条件为6000r/min转速下离心25min；步骤(2)中一级超滤膜分离条件为截留分子量为100kDa的聚砜中空纤维超滤膜，以0.2‑0.3MPa压力，25℃下超滤，二级超滤膜分离条件为截留分子量为40kDa的聚砜中空纤维超滤膜，以0.5‑0.6MPa压力，25℃下超滤，真空浓缩条件为真空度0.1MPa，60℃恒温水浴中浓缩，加入4倍于浓缩液体积的无水乙醇，离心条件为6500r/min离心25min，冷冻干燥条件为‑55℃、真空度0.1MPa，干燥24h。