发明名称 一种诱导棉花愈伤快速生长的处理方法
摘要 本发明公开了一种诱导棉花愈伤快速生长的处理方法,包括如下步骤:利用双氧水消毒处理棉花种子半小时,在超净台用灭菌水洗净双氧水后,用灭菌水浸泡种子,露白后种入MS培养基中,常规培养生长7天,取所得无菌幼苗下胚轴,农杆菌侵染后,转移放入共培养基上进行培养,黑暗条件下共培养48小时;共培养结束后,将所得的棉花下胚轴放入含有抗性筛选的愈伤诱导培养基中,置于单色蓝光下,16小时蓝光光照,8小时黑暗,间隔进行愈伤诱导,愈伤诱导结束后,待愈伤生长至约黄豆颗粒大小时,将获得的愈伤取下转入新鲜诱导培养基,继续增殖,直至进入胚型愈伤诱导阶段。本发明可有效加快植物愈伤诱导阶段的愈伤增殖生长,减少愈伤诱导周期。
申请公布号 CN106258953A 申请公布日期 2017.01.04
申请号 CN201610595494.1 申请日期 2016.07.18
申请人 运城学院 发明人 王霞;张元;陈磊;马燕斌
分类号 A01H4/00(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种诱导棉花愈伤快速生长的处理方法,其特征在于,在单色蓝光下处理诱导植物愈伤生长,包括如下步骤:S1、利用双氧水消毒处理棉花种子半小时,倒去双氧水,在超净台用灭菌水清洗2‑3次洗净双氧水后,用灭菌水浸泡种子24小时,露白后种入MS培养基中,常规培养生长7天,得无菌幼苗;S2、取所得无菌幼苗下胚轴,切段约1厘米,农杆菌侵染5‑10分钟后,倒掉农杆菌菌液,用无菌滤纸吸干残留菌液,转移放入共培养基上进行培养,该培养基为常规培养基,具体配方为MS 4g/L、KNO3 1g/L、葡萄糖25g/L、琼脂6g/L、2,4‑D、KT黑暗条件下共培养48小时;S3、共培养结束后,将所得的棉花下胚轴放入含有抗性筛选的愈伤诱导培养基中,具体配方为MS4g/L、KNO31g/L、葡萄糖25g/L、琼脂6g/L、2,4‑D、2,4‑D100ul/L、头孢0.5g/L,置于波长为450nm,光照强度为50‑140勒克斯的单色蓝光下,16小时蓝光光照,8小时黑暗,间隔进行愈伤诱导1‑2个月,期间根据需要换新鲜诱导培养基;具体配方为MS4g/L、KNO31g/L、葡萄糖25g/L、琼脂6g/L、2,4‑D、KT、筛选剂;S4、愈伤诱导约2‑3个月,待愈伤生长至约黄豆颗粒大小时,将获得的愈伤取下转入新诱导培养基中,具体配方为MS4g/L、KNO31g/L、葡萄糖25g/L、琼脂6g/L、2,4‑D100ul/L、KT100ul/L、头孢0.5g/L,培养7个月后,形成胚型愈伤。
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