一种百香果的脱毒方法

摘要

本发明公开了一种百香果的脱毒方法，其包括如下步骤：1、种子热处理；2、种子消毒处理；3、砧木培养；4、茎尖消毒处理；5、茎尖热处理；6、接穗繁殖；7、茎尖嫁接；8、生根培养；9、嫁接苗移栽；10、PCR检测。通过该方法可以全部脱除百香果花叶病毒CMV和木质化病毒PWV，解决了以往百香果种苗脱毒难的问题，经过2年试验，百香果增产率达到50%，值得在生产实际中应用推广。

主权项

一种百香果的种苗脱毒方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）种子热处理：将百香果果实中充分发育的种子取出，放进砂布内包好，先在40～46℃左右湿水中浸泡5～10分钟，再放入50～60℃热水中处理50～60min，取出后吸干水分；（2）种子消毒：在无菌条件下，将热处理过的种子浸泡在70%酒精溶液中3～10min，再放人8%漂白粉澄清液或0.1%升汞中消毒5～10min，然后用无菌水冲洗3～5次；（3）砧木培养：剥去种皮，接种于砧木培养基上，每支试管接种2～3粒种子，置于黑暗恒定27±2℃温度下发芽培养，待幼苗生长13～14天可作嫁接砧木，嫁接前置于室内散射光下培养1～2t；所述砧木培养基组成为：MS无机盐类+3%蔗糖+1%琼脂，pH5.7；（4）茎尖消毒：从果园中结果母树上选择生长旺盛的新梢，取枝顶端约5cm嫩梢，在室内剪成1～1.5cm长，用自来水冲洗后在75%酒精中消毒10s，再用8%漂白粉过滤液中消毒5min，以无菌水冲洗3～5次；（5）茎尖热处理：茎尖热处理先在40～50℃左右湿水中浸泡5～10min，再放入50～60℃热水中处理50～60min；（6）接穗繁殖：切取1～2mm茎尖，带2～3个叶原基，接种在MS+BA0.25毫克/升+NAA0.1毫克/升的培养基上；（7）茎尖嫁接：采用倒“T”形切接和嵌芽腹接，倒“T”形切接法：将砧木苗从试管内取出，切去过长的根，缩短至4～6cm，切去茎的上部使上胚轴剩下约l～1.5cm，把子叶和腋芽去掉，在上胚轴前端切出倒“T”形缺口，然后把事先剥好的带2～3个叶原基，高约0.2～0.4mm的茎尖切下，立即转接到制备好的倒“T”形缺口上；得无毒苗；（8）生根培养：嫁接培养后的百香果脱毒苗接种至生根培养基中，进行生根培养30d～40d；所述生根培养基配方，按质量百分数计，蔗糖2%～3%、琼脂0.8%～1.0%、MS+6‑BA 0 .08%～0 .12%、γ‑PGA0.1%～0 .15%、余量为水；（9）嫁接苗移栽培养：当植株根长至 2～3cm 时，进行驯化移栽，移栽于营养钵中，10～15d 后可移栽到果园，然后按照防虫网室标准建立基地管理，防治蚜虫、红蜘蛛和介壳虫的为害；（10）PCR检测：经PCR检测，确认苗木无病毒可以出圃。