pH梯度洗脱法同步分离甘草膏中三萜皂苷类及甘草黄酮类化合物的方法

摘要

本发明涉及pH梯度洗脱法同步分离甘草膏中三萜皂苷类及甘草黄酮类化合物的方法。经过1)上样溶液的制备、2)大孔树脂的预处理、3)上样吸附、4)预热和5)应用夹层层析柱进行pH梯度洗脱采用碳酸钠溶液、碳酸氢钠溶液或氢氧化钠溶液等不同碱性的溶液进行pH梯度洗脱，分别得到了三萜皂苷类成分为主的洗脱液和含甘草黄酮类成分及其它有用成分的洗脱液，甘草酸的收率与乙醇溶液作洗脱剂同比可提高2～4倍，同时降低了乙醇的消耗以及回收乙醇带来的能耗，甘草酸的收率与常温洗脱工艺同比最高可提高60％以上，同时也为化学、化工和制药领域中温敏性特殊成分的非常温柱分离提供一种简便易行的实验装置，具有推广的价值。

主权项

pH梯度洗脱法同步分离甘草膏中三萜皂苷类及甘草黄酮类化合物的方法，其特征在于步骤如下：1)上样溶液的制备将甘草流浸膏在常温下加纯化水搅拌溶解，其中流浸膏：纯化水体积比1:1～1：4；以转速2000r/min～4000r/min离心15～30min，取上清液配制成上样溶液；2)大孔树脂的预处理将通过静态吸附洗脱的药用级树脂用乙醇浸泡24h后，用纯化水洗涤树脂至无醇味，加水浸泡备用；3)上样吸附：称取经预处理的药用级树脂装入可控制柱温的高硼硅酸盐玻璃夹层层析柱，平衡12～24h后，上样吸附至饱和；4)预热上样吸附饱和后，采用泵将恒温水浴锅中加热至40℃～60℃的热水从层析柱夹套层下部的热流体下接管通入夹层，对层析柱本体及其中的填料和洗脱剂进行预热，热水在夹层中循环加热后从夹套层上部的热流体上接管流出，回到恒温水浴锅中循环使用；预热时间为0.5～1h；5)应用夹层层析柱进行pH梯度洗脱预热结束之后开始pH梯度洗脱；洗脱过程与预热过程一样采用泵将恒温水浴锅中加热至40℃～60℃的热水从层析柱夹套层下部的热流体下接管通入夹层，对层析柱本体及其中的填料和洗脱溶剂持续供热，热水在夹层中循环加热后从夹套层上部的热流体上接管流出，回到恒温水浴锅中循环使用，直至洗脱结束；同时依次将不同pH值的碱性洗脱液按先后顺序从层析柱本体上端的进料口加入，分段收集；先采用1～2BV的1％～5％碳酸钠溶液或1％～5％碳酸钾溶液洗脱，收集得到三萜皂苷类成分为主的洗脱液，然后采用1～2BV的1％～5％碳酸氢钠溶液或1％～5％碳酸氢钾溶液或0.5％～2％氢氧化钠溶液洗脱，收集得到含甘草黄酮类成分及其它有用成分的洗脱液；所述的药用级树脂为HPD100、HPD400、HPD450、D101或AB‑8。