一种基于复合光子晶体微球的多组分表面增强拉曼光谱检测方法

摘要

本发明公开了一种基于复合光子晶体微球的多组分表面增强拉曼光谱检测方法，通过亲和素‑生物素系统，将量子点均匀修饰在银纳米粒子包覆的二氧化钛光子晶体微球表面，生成可编码的复合光子晶体微球材料，将量子点与银纳米粒子包覆二氧化钛光子晶体微球基底材料结合运用到多组分表面增强拉曼光谱检测中，通过量子点的编码/解码与拉曼信号结合，实现了对不同生物分子的多元检测。本发明利用银纳米粒子包覆二氧化钛光子晶体微球作为编码载体，进行生物检测时具有比表面积大、生物相容性高、操作过程简单快捷等优点，量子点的荧光光谱峰与SERS特征谱峰相结合，可有效应用于生物检测方面多元检测。

主权项

一种基于复合光子晶体微球的多组分表面增强拉曼光谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，制备复合光子晶体微球：将银纳米粒子包覆二氧化钛光子晶体微球按质量比为800～600:1加入到链霉亲和素溶液中，4℃过夜后加入1％的牛血清蛋白溶液封闭，清洗后得到修饰有链霉亲和素的银纳米粒子包覆二氧化钛光子晶体微球；将CdTe量子点的水溶液与生物素溶液按CdTe量子点的摩尔量与生物素的质量的比为4～6.4:1在室温下混合，摇床反应，得到修饰有生物素的CdTe量子点溶液；将修饰有链霉亲和素的银纳米粒子包覆二氧化钛光子晶体微球加入到修饰有生物素的CdTe量子点溶液中，摇床反应后清洗得到复合光子晶体微球；加入不同发光颜色的CdTe量子点，制备不同编码的复合光子晶体微球；步骤2，固定包被用抗体：将步骤1得到的复合光子晶体微球置于包被用抗体的磷酸盐缓冲溶液中，4℃过夜，洗涤后加入1％的牛血清蛋白溶液封闭，清洗后得到固定有包被用抗体的复合光子晶体微球；步骤3，制备拉曼信号放大探针：将拉曼探针分子对巯基苯甲酸的磷酸盐缓冲溶液、银纳米颗粒的磷酸盐缓冲溶液加入到标记用抗体的磷酸盐缓冲溶液中，触发反应后4℃过夜，清洗后得到固定有标记用抗体的对巯基苯甲酸/抗体/银纳米颗粒拉曼信号放大探针；步骤4，多组分表面增强拉曼光谱检测：将多种固定有包被用抗体的复合光子晶体微球和相应的多种固定有标记用抗体的对巯基苯甲酸/抗体/银纳米颗粒拉曼信号放大探针加入待测溶液中，25～37℃下温浴反应，冲洗液冲洗后，检测微球表面的拉曼和荧光信号，根据量子点荧光确定待测溶液中的生物分子的种类，根据拉曼信号强度确定待测溶液中各生物分子的浓度。