一种采用连续监测法定量测定AST的试剂制备方法

摘要

本发明公开了一种采用连续监测法定量测定AST的试剂制备方法，本方法采用液体双试剂来实现，属于生物技术领域。本发明的目的是提供一种能够有效消除内源性α‑酮戊二酸干扰且稳定性良好的AST试剂制备方法，使测定出的AST结果更加准确可靠。本发明有关AST的试剂制备方法如下：试剂1和试剂2先用蒸馏水作溶剂配制成一定浓度的缓冲溶液，调至合适的PH值之后将稳定剂、酶保护剂依次溶解于试剂1中；将稳定剂溶解于试剂2中，充分混合直至完全溶解，之后分别加入相应的底物和酶，最后均加入一定量的防腐剂，2‑8℃密封保存。本发明所提供的AST试剂制备方法具有准确度高、稳定性好的特点。

主权项

一种采用连续监测法定量测定AST的试剂制备方法，由液体双试剂组成，其特征在于包括以下步骤：分别配制浓度为120mmol/L‑180mmol/L等浓度的Tris和Tris‑HCl溶液，将其相同浓度对应调制成PH＝8.2的缓冲溶液，作为试剂1的溶剂；分别配制浓度为60mmol/L‑100mmol/L等浓度的Tris和Tris‑HCl溶液，将其相同浓度对应调制成PH＝7.4的缓冲溶液，作为试剂2的溶剂，其次在试剂1中加入一定量的酶保护剂和稳定剂；在试剂2中加入一定量的稳定剂，充分混合直至完全溶解，之后于试剂1中加入浓度为400mmol/L‑600mmol/L的L‑天门冬氨酸、浓度为0.2mmol/L‑0.4mmol/L的还原型辅酶(NADH)、浓度为800U/L‑1200U/L苹果酸脱氢酶(MDH)；于试剂2中加入浓度为60mmol/L‑80mmol/L的α‑酮戊二酸，最后于试剂1和试剂2中均加入一定量的防腐剂，2‑8℃密封保存。