一种双相多酶偶联体系高效制备(S)‑2‑(4‑硝基苯基)环氧乙烷的方法

摘要

本发明公开了一种双相多酶偶联体系高效制备(S)‑2‑(4‑硝基苯基)环氧乙烷的方法，属于生物工程技术领域。本发明以含羰基还原酶(SyS1)基因和葡萄糖脱氢酶(SyGDH)基因的共表达重组大肠杆菌BL21(pETDuet‑Sygdh‑Sys1)为催化剂，并添加一定量的NADP⁺和葡萄糖，在磷酸钾缓冲液/异丁醇两相反应体系中实现双酶偶联催化α‑溴代对硝基苯乙酮高效制备中间产物(S)‑2‑溴‑1‑(4‑硝基苯基)乙醇，其摩尔产率可达99.8％。继续向反应体系中添加破碎SyHheC粗酶液和缓冲液，反应得到产物(S)‑2‑(4‑硝基苯基)环氧乙烷摩尔产率可达99.9％，e.e.值＞99％。

主权项

一种双相多酶偶联制备(S)‑2‑(4‑硝基苯基)环氧乙烷的方法，其特征在于，在缓冲溶液/异丁醇两相反应溶液中，利用葡萄糖脱氢酶和羰基还原酶不对称还原对硝基溴代苯乙酮得到中间产物(S)‑2‑溴‑1‑(4‑硝基苯基)乙醇，再以卤代醇脱卤酶催化(S)‑2‑溴‑1‑(4‑硝基苯基)乙醇生成(S)‑2‑(4‑硝基苯基)环氧乙烷。