一种基于纤维载体的固定化漆酶及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种基于纤维载体的固定化漆酶及其制备方法和应用。所述基于纤维载体的固定化漆酶包括：作为载体的纤维、分布于所述纤维表面的活性分子、包覆所述纤维和活性分子的介孔氧化硅层以及包埋在所述介孔氧化硅层中的漆酶；其中所述介孔氧化硅层是所述活性分子催化有机硅烷在所述纤维表面沉积形成的。本发明的固定化漆酶的酶活回收率高、固定化效率高、重复使用性好且可操作性好；所述制备方法的反应条件温和，极大地保护了漆酶的活性；本发明的固定化漆酶可用于食品、纺织、纸浆造纸或污水处理等领域中。

主权项

一种基于纤维载体的固定化漆酶，其特征在于：采用聚苯乙烯静电纺丝超细纤维作为固定化漆酶的载体，该纤维的平均直径为700nm；首先，取10mg纤维浸没在9.8M的浓硫酸中，5min后捞出，用去离子水反复漂洗，直到漂洗前后，漂洗液体pH值不再变化；其后，将纤维浸泡在1mg/mL的聚二烯丙基二甲基氯化铵(PDADMAC)的水溶液，10min后将纤维捞出，用去离子水洗涤3次，然后泡在1mg/mL的聚丙烯酸接枝烷基溴(PAA‑g‑Alkyl Bromide)水溶液中，10min后，捞出纤维，用去离子水洗涤3次，重复上述聚二烯丙基二甲基氯化铵和聚丙烯酸接枝烷基溴水溶液浸泡并洗涤的操作2次；其后，将10mg纤维分散在16mL水中，并在其中加入2mL甲基丙烯酸N,N‑二甲基氨基乙酯和8mg 2,2‑联吡啶，冻‑抽‑融操作3次后，在气体保护下，加入5mg溴化亚铜，常温下过夜搅拌；至此，聚苯乙烯纤维上修饰上了富胺基的甲基丙烯酸N,N‑二甲基氨基乙酯；在1mM盐酸中配制浓度为1mM的3‑巯丙基三乙氧基硅烷，静置直到观察溶液清澈透明；称取漆酶20mg，分散在18mL去离子水中，反复震荡，直至溶液清澈透明；将漆酶溶液与2mL 3‑巯丙基三乙氧基硅烷溶液混合，再将10mg修饰好的纤维浸没在混合溶液中，常温下2h或者4℃过夜，即得到固定化漆酶。