一种利用发夹引物进行多重PCR的方法

摘要

本发明涉及一种利用发夹引物进行多重PCR的方法和试剂盒、以及在建立二代测序平台文库中的应用。发夹引物3’端特异序列与目标区段完全配对，解链温度在80℃以上，在PCR反应时只在变性程序中打开发夹结构。可以有效减少非特异扩增和引物二聚体的形成，提高多重PCR产物的均一性。本发明还利用多重发夹引物进行两轮PCR反应快速方便地构建二代测序文库，并通过携带不同条形码序列的接头引物以区分不同模板，而不同的接头引物携带相同的通用扩增引物，以减少不同模板扩增产物的差异。

主权项

一种利用发夹引物进行多重PCR的方法，其特征在于，与目标区段序列特异性配对的引物是发夹引物。