一种提高辣椒体细胞胚发生频率的方法

摘要

本发明为一种提高辣椒体细胞胚发生频率的方法，包括种子的消毒与播种、无菌苗的获得、外植体的选择和愈伤组织的诱导、体细胞胚的诱导、体细胞胚的继代与增值、体细胞胚的成熟步骤；外植体为子叶或下胚轴；从愈伤组织诱导到体细胞胚的成熟过程均在黑暗条件下进行。本发明缩短了辣椒体胚发生的时间，提高了体胚发生的量，从而改善了体胚的发生效率。为实现辣椒转基因研究、生物技术育种等奠定了基础。

主权项

一种提高辣椒体细胞胚发生频率的方法，其特征在于，包括种子的消毒与播种、无菌苗的获得、外植体的选择和愈伤组织的诱导、体细胞胚的诱导、体细胞胚的继代与增值、体细胞胚的成熟步骤；外植体为子叶或下胚轴；从愈伤组织诱导到体细胞胚的成熟过程均在黑暗条件下进行；其中，无菌苗的获得过程中使用的MS₁培养基为：1/2MS+蔗糖30g/L+琼脂8g/L；外植体的选择和愈伤组织的诱导过程中使用的MS₂培养基为：MS+2，4‑D2mg/L+Biotin1mg/L+半胱氨酸5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L；体细胞胚的诱导过程中使用的MS₃培养基为：MS+2，4‑D 1mg/L+半胱氨酸5mg/L+蔗糖35g/L；体细胞胚的继代与增值过程中使用的MS₄培养基为：MS+2，4‑D1mg/L+6‑BA1.5mg/L+Biotin1mg/L+L‑脯氨酸100mg/L+麦芽提取物100mg/L+蔗糖40g/L；体细胞胚的成熟过程中使用的MS₅培养基为：MS+ABA0.5mg/L+蔗糖45g/L。