一种从蚕蛹中提取总RNA的方法

摘要

本发明公开了一种从蚕蛹中提取总RNA的方法。它包括细胞裂解、抽提、过柱、洗涤、晾干、溶解，本发明方法操作简便，成本低，提取得到的RNA纯度高，完整性好，质量好，可以满足高要求分子生物学实验操作。

主权项

一种从蚕蛹中提取总RNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取100mg蚕蛹组织样本，放入预冷的研钵中进行研磨；(2)将研磨后的组织加入到1mLTrizol裂解液中，涡旋混匀仪混匀5min，室温静置10min；(3)室温12000g离心10min，将上清液转移到新的2.0mL的离心管中；(4)向步骤(3)中得到的上清液中加入300μL的氯仿/异戊醇混合液，震荡混匀使其看不到明显的分层；(5)4℃，12000g离心10min，取上清液；(6)向步骤(5)中得到的上清液中加入1倍体积的无水乙醇，吹打混匀；(7)将上一步的液体转移到RNA吸附柱中；(8)4℃12000g离心1min，弃废液；(9)向RNA吸附柱中加入700μL的去蛋白液，4℃12000g离心1min，弃废液；。(10)向RNA吸附柱中加入500μL的漂洗液，4℃12000g离心1min，弃废液；(11)4℃12000g离心2min；(12)将RNA吸附柱置于新的1.5ml离心管，加入30ul DEPC水到过RNA吸附柱滤膜的正中心，静置1min；(13)12000g离心1min，回收RNA。