发明名称 |
快速鉴定南瓜杂交种纯度的方法及其应用 |
摘要 |
本发明公开了一种快速鉴定南瓜杂交种纯度的方法及其应用,涉及南瓜杂交种的纯度鉴定技术领域。该方法包括以下步骤:A、提取南瓜杂交种子的DNA;B、以提取的DNA作为模板,配制聚合酶链式反应PCR体系,利用SSR引物对提取出的DNA进行PCR扩增;PCR扩增的反应条件为:94℃~96℃变性2~20s,60℃退火2~20s,72℃延伸5~20s,33~35个循环,得到PCR扩增产物;C、将PCR扩增产物进行电泳分离;D、根据电泳分离出的条带,计算种子纯度。本发明能够将现有的PCR所需时间缩短75.7%,大幅提高SSR方法测定种纯的速度,能够满足大批量生产,且无需使用昂贵进口仪器,从而大幅降低早期投入与后期生产成本。 |
申请公布号 |
CN106167828A |
申请公布日期 |
2016.11.30 |
申请号 |
CN201610723650.8 |
申请日期 |
2016.08.25 |
申请人 |
安徽江淮园艺种业股份有限公司 |
发明人 |
戴祖云;高秀武;王雯雯;赵传奇 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 |
代理人 |
汤东凤 |
主权项 |
一种快速鉴定南瓜杂交种纯度的方法,其特征在于,包括以下步骤:A、选取南瓜杂交种子,分别提取每一粒种子中的DNA;B、以每一粒种子所提取的DNA作为模板,各配制一份聚合酶链式反应PCR体系,利用SSR引物对提取出的DNA进行PCR扩增;所述PCR扩增的反应条件为:94℃~96℃变性2~20s,60℃退火2~20s,72℃延伸5~20s,33~35个循环,得到PCR扩增产物;C、将PCR扩增产物在琼脂糖凝胶中进行电泳分离;D、选取的南瓜杂交种子中,有一部分父本、母本种子,根据电泳分离出的条带,判断杂交种、父本、母本,计算种子纯度;杂交种纯度的计算公式为:杂交种的数量/测定的种子总数×100%。 |
地址 |
230031 安徽省合肥市蜀山经济开发区仰桥路77号 |