发明名称 抗体蛋白二硫键配对分析方法
摘要 本发明涉及抗体蛋白二硫键配对分析方法,该方法依次包括如下步骤:1)、对蛋白质进行去除N‑糖处理;2)、对除去N‑糖的蛋白质进行变性处理;3)、在非还原条件下使用特异性酶酶解变性处理后的蛋白质;4)、将酶解后的所述蛋白质分成两份样品,对其中一份样品进行还原,对另一份样品不进行还原,两份样品均终止酶解;5)、对终止酶解后的样品的二硫键肽段进行质量肽谱图分析。该方法克服了现有技术中N‑糖对特异性酶酶解蛋白时的空间位阻作用以及肽段离子化效率的抑制,减少了酶切方式,能准确确认及定位二硫键肽段。
申请公布号 CN106153745A 申请公布日期 2016.11.23
申请号 CN201510145271.0 申请日期 2015.03.31
申请人 三生国健药业(上海)股份有限公司 发明人 吕锋华;黄黎明;环民霞;刘周阳;谭青乔
分类号 G01N30/02(2006.01)I;G01N30/06(2006.01)I 主分类号 G01N30/02(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种蛋白质二硫键配对分析方法,依次包括如下步骤:1)、对蛋白质进行去除N‑糖处理;2)、对除去N‑糖的蛋白质进行变性处理;3)、在非还原条件下使用特异性酶酶解变性处理后的蛋白质;4)、将酶解后的所述蛋白质分成两份样品,对其中一份样品进行还原,对另一份样品不进行还原,两份样品均终止酶解;5)、对终止酶解后的样品的二硫键肽段进行质量肽谱图分析。
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