一种用喷雾干燥法制备粪肠球菌微胶囊菌粉的方法

摘要

本发明公开了一种利用喷雾干燥法制备粪肠球菌微胶囊菌粉的方法，旨在提供一种通过多种活性保护技术的结合提高粪肠球菌的抗干燥能力和产品活菌数，能够实现规模化生产的方法。将高密度培养得到的粪肠球菌活菌培养物采用预培养或热激处理作为代谢调节手段，所述保护剂由海藻糖、蔗糖、维生素c组成；选用大豆蛋白和瓜尔豆胶(或阿拉伯胶)混合物作为壁材，含有保护剂的粪肠球菌菌体悬浮液作为芯材.通过喷雾干燥得到粪肠球菌微胶囊菌粉。喷雾干燥，进风温度80～120℃，出风温度60～80℃，雾化器压力为150kPa。所得菌粉的存活率在70％以上，活菌数在10¹¹个/g以上。

主权项

一种利用喷雾干燥法制备粪肠球菌微胶囊菌粉的方法，其特征在于，包括下述步骤：(1)高浓度培养：将活化后的粪肠球菌菌体培养物以体积分数为1％接种量接种至MRS液体培养基，在37℃下培养14～24小时，使最大培养活菌数达10¹⁰个/ml以上；(2)采用预培养或热激处理作为代谢调节手段：所述预培养方法为：将步骤(1)高密度培养得到的粪肠球菌活菌培养物于4℃水浴冷却10‑20分钟，离心收集粪肠球菌菌体沉淀物，之后将保护剂添加液通过无菌操作加入到收集的粪肠球菌离心后的菌体沉淀物，震荡5分钟使悬浮均匀，4℃静置1～2h，之后，于37℃下继续培养1～2小时，得到含有保护剂的粪肠球菌菌体悬浮液；所述热激处理方法为：将步骤(1)高密度培养得到的粪肠球菌活菌培养物在热激温度为50℃的水浴中加热15min，之后，在37℃下培养1～2h，离心收集粪肠球菌菌体沉淀物；将保护剂添加液通过无菌操作加入到收集的粪肠球菌离心后的菌体沉淀物中，震荡5分钟使悬浮均匀，4℃静置1～2h，得到含有保护剂的粪肠球菌菌体悬浮液；其中，所述保护剂由海藻糖、蔗糖、维生素C组成，按照收集得到的粪肠球菌离心后的菌体沉淀物重量的百分比计的加入量为：0.6‑1.2％海藻糖，2‑8％蔗糖，0.02‑1.0％维生素C。(3)制备粪肠球菌微胶囊：选用大豆蛋白和瓜尔豆胶混合物、大豆蛋白和明胶的混合物、大豆蛋白和阿拉伯胶的混合物中的任一种作为壁材，含有保护剂的粪肠球菌菌体悬浮液作为芯材；在壁材中加入壁材重量3倍的水溶解，之后均质5分钟，121℃灭菌15分钟，冷却到40℃；再加入含有保护剂的粪肠球菌菌体悬浮液和壁材溶液重量0.1～0.5％的Tween‑80，5000r/min二次均质10分钟，之后喷雾干燥，得到粪肠球菌微胶囊菌粉：其中，喷雾干燥进风温度80～100℃，出风温度60～80℃，雾化器压力为100～150kPa。