发明名称 |
一种高效穿梭表达载体及其构建方法与应用 |
摘要 |
本发明公开了属于生物技术领域的一种高效穿梭表达载体及其构建方法与应用。本发明是在<i>E. coli-B. subtilis</i>穿梭载体pHT315的基础上构建的,通过将枯草芽孢杆菌Bs168的木糖启动子序列与来自<i>E. coli</i>表达载体pET21b的T7表达区序列融合,构建了一个高效穿梭表达载体pHTL,以<i>gfp</i>,<i>gus</i>和<i>lipa</i>为报告基因,检测载体的表达能力和遗传稳定性;同时,将来自纳豆芽孢杆菌的碱性蛋白酶信号肽序列代替载体pHTL上的T7肽编码区,构建成高效分泌型穿梭表达载体pHTZ,以<i>gus</i>,<i>tgl1</i>和<i>lipa</i>为报告基因,检测载体的表达能力。两种载体均可以正确表达相应蛋白并具有生物学活性,具有广泛的应用前景。 |
申请公布号 |
CN106148380A |
申请公布日期 |
2016.11.23 |
申请号 |
CN201510199070.9 |
申请日期 |
2015.04.24 |
申请人 |
河北农业大学 |
发明人 |
檀建新;李志辉;张莹莹;申培立;张蕴哲;任蓓蕾;亢春雨;于宏伟;卢海强;马雯;张伟;陈中义 |
分类号 |
C12N15/75(2006.01)I;C12N15/64(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12R1/125(2006.01)N |
主分类号 |
C12N15/75(2006.01)I |
代理机构 |
|
代理人 |
|
主权项 |
一种高效穿梭表达载体,其特征在于,所述表达载体为pHTL,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示。 |
地址 |
071001 河北省保定市灵雨寺街289号 |