一种基于连接的环介导等温扩增技术用于基因突变检测方法

摘要

本发明提供了一种基于连接的环介导等温扩增技术用于基因突变检测方法，所述检测方法包括如下步骤：(1)以目标DNA为模板设计两条DNA发夹探针H1和H2；(2)在目标存在的情况下，目标DNA与H1和H2退火杂交，在H1的3'末端完全互补的情况下，用连接酶将H1和H2连接形成双哑铃DNA结构；(3)以双哑铃DNA为模板进行环介导等温扩增反应，得到环介导等温扩增产物；(4)向环介导等温扩增产物中加入DNA双链特异性染料SYBR GreenI后荧光信号增强，通过对荧光信号的检测实现对基因突变的定量检测。本发明所述的基因突变检测方法具有非常低的检测下限，较高的选择性和特异性。

主权项

一种基于连接的环介导等温扩增技术用于基因突变检测方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)以目标DNA为模板设计两条DNA发夹探针H1和H2；(2)在目标存在的情况下，目标DNA与H1和H2退火杂交，用连接酶将H1和H2连接形成双哑铃DNA结构；(3)以双哑铃DNA为模板进行环介导等温扩增反应，得到环介导等温扩增产物；(4)向环介导等温扩增产物中加入DNA双链特异性染料SYBR Green I。