刀额新对虾中磷脂的亲水色谱‑串联质谱检测方法

摘要

本发明公开了一种刀额新对虾中磷脂的亲水色谱‑串联质谱检测方法，包括以下步骤：1)、样品前处理：将刀额新对虾肉研磨成虾糜后进行相应的前处理，得脂质粗提物；2)、液相分离：将脂质粗提物进行液相分离；色谱柱为YMC Triart二醇基HILIC柱；色谱条件采用梯度洗脱法，梯度系统由流动相A和流动相B组成；其中流动相A为含有53mmol/L甲酸的乙腈溶液，流动相B为含有60mM甲酸铵和53mM甲酸的水溶液；3)、将步骤2)所得的洗脱液进行质谱检测分析。采用本发明的方法能准确检测出样品中PE、PS和PC的总含量，以及实现对PC、PE及PS三类磷脂中各个分子种进行质谱分析鉴定。

主权项

刀额新对虾中磷脂的亲水色谱‑串联质谱检测方法，其特征在于包括以下步骤：1)、样品前处理：将刀额新对虾肉研磨成虾糜，按照1g/15～20ml的料液比，在虾糜中加入有机溶剂Ⅰ后震荡混匀；然后进行超声冰浴提取，提取完毕后加入纯水并震荡混匀，得混合物，每1g虾糜配用10～15mL的超纯水；有机溶剂Ⅰ为甲醇和氯仿的混合液，甲醇与氯仿的体积比为0.5～2：1；混合物用冷冻离心机离心，从离心所得物中移取下相溶液；所述下相溶液低温干燥后，用有机溶剂Ⅱ复溶，得脂质粗提物；所述有机溶剂Ⅱ是体积浓度≥30％的甲醇水溶液、或甲醇，2)、液相分离：将脂质粗提物进行液相分离；色谱柱为YMC Triart二醇基HILIC柱；色谱条件采用梯度洗脱法，梯度系统由流动相A和流动相B组成；其中流动相A为含有53mmol/L甲酸的乙腈溶液，流动相B为含有60mM甲酸铵和53mM甲酸的水溶液；梯度系统为：0～15min，维持2％流动相A；15～60min，将流动相A从2％提高到40％；60～70min，维持40％流动相A；70～80min，将流动相A从40％降回初始状态的2％；上述％均为体积％；3)、将步骤2)所得的洗脱液进行质谱检测分析。