京薯6号组培脱毒培育的方法

摘要

本发明是京薯6号组培脱毒培育的方法，其培育步骤为：首先选取无当年收获的无病虫害、色泽纯正、大小匀称的京薯6号块根，对其清洗消毒后放入培养箱中进行恒温催芽，然后，选取长度1～2cm的健壮的芽条进行消毒，在解剖镜下剥取带1～2片叶原基的生长点，将其接种到培养基中，对其进行培养，当芽点形成后，转移到新的培养基中进行培养，并进行初级扩繁培育，再对植株进行病毒检测，留下健康无病毒的植株，将无毒苗切成单节茎段扦插培养基中进行培养，最后对其进行驯化，可移栽在基质中。本发明实现了京薯6号的脱毒育苗，可以有效地实现无毒苗的培育，防止品种退化，提高产量与质量。

主权项

京薯6号组培脱毒培育的方法，其特征在于，其步骤如下：(1)选取当年收获的无病虫害、色泽纯正、大小匀称、无裂痕的京薯6号块根，在自来水下洗净泥土，用0.1％的高锰酸钾浸泡处理15min，再用0.5％的多菌灵浸泡1h后捞出晾干，置于装有高温灭菌后的珍珠岩的培养箱中进行恒温催芽，温度设为28℃，相对湿度为80％～85％，待萌出薯芽后，于35～40℃的高温下热处理30天，每天处理8h；(2)将热处理后的京薯6号薯芽选取长度1～2cm的健壮的芽条，在自来水下冲洗30min，用滤纸吸干表面的水分，再在超净工作台内用75％的乙醇浸泡30s，再用10％次氯酸钠加2滴吐温‑80溶液浸泡20min，使用无菌水冲洗2～3次，最后用消毒滤纸吸干表面水分；(3)将消毒后的芽苗置于体视解剖镜下，用解剖针剥取带有1～2个叶原基的茎尖组织，接种到加入了6‑BA1.0mg/L、NAA0.2mg/L、GA0.05mg/L、蔗糖30g/L、卡拉胶6g/L的MS培养基上进行诱导培养，培养温度28℃，湿度50％，光照强度2000～3000Lx，光照时间10h/d；(4)培养25天后，茎尖形成芽点，且在基部形成了愈合组织，此时，将芽点转移到MS培养基中进行培育，培养温度为28℃，光照强度2000～3000Lx，光照时间10h/d，使茎尖苗长至3～6cm；(5)将茎尖苗切成单节茎段在新的MS培养基上进行初级扩繁培育，培养温度为28℃，光照强度2000～3000Lx，光照时间10h/d；(5)用血清法对幼苗进行病毒检测，去除仍带有病毒的植株，留下脱毒苗；(6)当脱毒苗长至8cm时，将其切成单节茎段扦插在加入了6‑BA1.0mg/L、白砂糖30g/L、卡拉胶6g/L的MS培养基上进行培育，培养温度为28℃，光照强度2000Lx，光照时间10h/d；(7)脱毒苗进行培育一个月之后，将其置于室温和自然光下驯化5天，然后洗去附着在植株根部的培养基，将苗的根部置于0.2％高锰酸钾溶液中浸泡2min后，取出晾干，移栽在基质中，盖拱膜，每天进行通风排气，即可培育出京薯6号无毒苗。