发明名称 |
一种干燥综合征小鼠模型的造模方法 |
摘要 |
本发明公开了一种干燥综合征小鼠模型的造模方法,包括以下步骤:小鼠处死,取出双侧颌下腺,剥离包膜及结缔组织,用PBS洗净,按照每个颌下腺加入0.5ml PBS的量加入PBS,将颌下腺剪碎,在冰浴中充分匀浆,离心,取上清液,采用BCA蛋白定量法定量颌下腺抗原,用PBS将颌下腺抗原浓度调整至4mg/ml,加入等量FCA或FIA,浓度稀释至2mg/ml,反复吹打直至两液相互溶并呈乳白色状;将C57BL/6小鼠随机分组,将小鼠尾背部的毛剃掉;分别在第0天,第7天于小鼠的尾背部皮内多点注射FCA配制的2mg/ml小鼠颌下腺抗原,注射量为0.1ml/只;在第14天用同样的方法注射等量的FIA配制的颌下腺抗原;造模6周左右,检测指标,筛选造模成功的小鼠;本发明的造模方法成模率高,造模时间短。 |
申请公布号 |
CN106110315A |
申请公布日期 |
2016.11.16 |
申请号 |
CN201610560982.9 |
申请日期 |
2016.07.15 |
申请人 |
魏伟 |
发明人 |
魏伟;吴华勋;顾芳 |
分类号 |
A61K39/00(2006.01)I |
主分类号 |
A61K39/00(2006.01)I |
代理机构 |
合肥鼎途知识产权代理事务所(普通合伙) 34122 |
代理人 |
叶丹 |
主权项 |
一种干燥综合征小鼠模型的造模方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤一,小鼠颌下腺抗原的制备:按需要取C57BL/6小鼠,脱颈椎处死,新洁尔灭消毒,无菌条件下取出双侧颌下腺,剥离包膜及结缔组织,用PBS洗净后放入无菌青霉素小瓶中,按照每个颌下腺加入0.5ml PBS的量,向无菌青霉素小瓶中加入PBS,将瓶内的颌下腺剪碎,在冰浴中充分匀浆,3000r/15min/4℃的条件离心,弃去上层脂质,取上清液,采用BCA蛋白定量法定量颌下腺抗原浓度,用PBS将颌下腺抗原浓度调整至4mg/ml,加入等量FCA弗氏完全佐剂或FIA弗氏不完全佐剂,将小鼠颌下腺抗原浓度稀释至2mg/ml,反复吹打直至两液相互溶并呈乳白色状,即制得注射用的2mg/ml小鼠颌下腺抗原;步骤二,将C57BL/6小鼠随机分组,保证各组的小鼠数量、体重、状态尽可能地相近;用剪刀或电动剃须刀将小鼠尾背部的毛剃掉以备注射抗原,正常对照组小鼠不作处理;步骤三,分别在第0天,第7天于小鼠的尾背部皮内多点注射步骤一制备的FCA配制的2mg/ml小鼠颌下腺抗原,注射量为0.1ml/只;在第14天用同样的方法注射等量的步骤一制备的FIA配制的颌下腺抗原;对照组小鼠用同样的方法注射等量的生理盐水;步骤四,造模6周左右,检测指标,筛选造模成功的小鼠。 |
地址 |
230032 安徽省合肥市梅山路81号 |