用于获得肉毒杆菌神经毒素的方法和系统

摘要

用于获得用于研究、治疗和美容用途的具有高效力、高产率的肉毒杆菌神经毒素的快速且不含动物蛋白质的色谱方法和系统。

主权项

一种用于获得A型生物活性肉毒杆菌神经毒素复合物的不含动物产物的色谱方法，所述方法包括以下连续步骤：(a)在不含动物产物的培养基中培养肉毒梭菌(Clostridium botulinum)细菌；(b)在2L至75L不含动物产物的发酵培养基中发酵来自所述培养基的肉毒梭菌细菌，其中所述培养基和所述发酵培养基中的至少一种包含植物蛋白；(c)通过移除所述发酵培养基中存在的细胞碎片收集所述发酵培养基；(d)通过过滤浓缩所收集的发酵培养基；(e)通过添加缓冲液稀释所述经过浓缩的发酵培养基；(f)第一接触步骤，其中使所述经过稀释的所收集的发酵培养基与阴离子交换介质接触，以使所述生物活性肉毒杆菌神经毒素被所述阴离子交换介质捕捉；(g)从所述阴离子交换介质洗提被捕捉的肉毒杆菌神经毒素，由此获得第一洗提液；(h)第二接触步骤，其中使所述第一洗提液与阳离子交换介质接触以从所述第一洗提液移除杂质，由此获得第二洗提液；(i)通过渗滤处理所述第二洗提液；和(j)过滤所述经过处理的第二洗提液，由此使用不含动物产物的色谱方法获得A型生物活性肉毒杆菌神经毒素复合物，其中所获得的所述A型肉毒杆菌神经毒素复合物具有每毫克A型肉毒杆菌神经毒素复合物2.0×10⁷至6.0×10⁷个单位的效力。