一种非洲菊种质资源的保存方法

摘要

本发明公开一种非洲菊种质资源的保存方法，包括非洲菊的花托外植体预处理、接种诱导培养、转移诱导培养、种质离体保存、恢复培养、幼苗的驯化与炼苗六个步骤。本发明涉及的一种非洲菊种质资源的保存方法，显著提高非洲菊种质资源的离体保存时间与效率，大大提高了非洲菊种质资源的保存时限，能长时间保存非洲菊的种质资源，具有应用前景。

主权项

一种非洲菊种质资源的保存方法，其特征在于：具体步骤如下：(1)花托外植体预处理：选取直径1～2cm的花蕾，在4℃环境中冷藏3～5天后，将花蕾取出自然恢复至室温，剥去苞片和小花，用纯净水冲洗，先在0.05％的升汞水溶液中消毒5～8min，再用70％的酒精消毒20～40s，之后用无菌水冲洗3次，即得到非洲菊花托外植体，以上涉及的百分比均为体积百分比；(2)外植体接种及诱导培养：将非洲菊花托外植体移入到灭菌后的第一培养基中，将温度设定为23±1℃，以蓝光灯为光源，光照强度控制为400～800Lx，光周期控制为光14h/暗10h，10天左右诱导出愈伤组织；(3)转移诱导培养：将步骤(2)得到的愈伤组织转移到第二培养基，温度为27±1℃，以荧光灯为光源，光照强度控制为1800～2500Lx，光周期控制为光14h/暗10h，14天愈伤组织诱导出嫩芽；(4)种质离体保存：将嫩芽从非洲菊花托外植体上完整地切下，转移到第三培养基内慢速生长保存，保存环境为：温度为4±1℃，以荧光灯为光源，光照强度控制为300～500Lx，光周期控制为光8h/暗16h；(5)恢复培养：将步骤(4)的嫩芽转移到第四培养基内，温度为27±1℃，以荧光灯为光源，光照强度控制为1800～2500Lx，光周期控制为光14h/暗10h，培养至形成非洲菊幼苗；(6)幼苗的驯化与炼苗：将非洲菊幼苗移栽到炼苗基质中，并逐步转移到外部环境中，在幼苗适应外部环境正常生长后，再移栽至普通土壤中正常培养。