表达包含V_L结构域的重链的人源化啮齿动物的制备方法

摘要

本申请提供了非人动物、组织、细胞和遗传物质，其包括内源性非人源重链免疫球蛋白序列的修饰并且包括在啮齿动物(例如小鼠)中具有功能的ADAM6活性，其中所述非人动物在重链恒定区背景下重排人源免疫球蛋白轻链基因区段并且表达免疫球蛋白样分子，所述免疫球蛋白样分子包括与重链恒定结构域融合的人源免疫球蛋白轻链可变结构域，其与同轻链恒定结构域融合的人源轻链可变结构域具有同源性。

主权项

制备人源抗原结合蛋白的方法，包括：(a)从在小鼠细胞中发现的编码与非人源重链恒定区融合的人源轻链可变结构域的核酸序列处，获取编码所述人源轻链可变结构域的核酸序列，其中所述人源轻链可变结构域与目标抗原结合；(b)将编码所述人源轻链可变结构域的核酸序列克隆进编码人源重链恒定区的基因框架中，以形成编码人源结合蛋白的人源结合蛋白序列；并且(c)在宿主细胞中表达所述人源结合蛋白；其中所述小鼠：(i)已使用目标抗原免疫；并且(ii)在其基因组中包括：(1)在非人源轻链恒定区上游的一个或多个人源V_L和一个或多个人源J_L基因区段的插入；(2)在非人源重链恒定区上游的一个或多个人源V_L和一个或多个人源J_L基因区段的插入；以及(3)编码ADAM6蛋白或其功能性片段的整合的核苷酸序列，其中所述ADAM6蛋白或其功能性片段由整合的ADAM6核酸序列表达。