猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA诊断试剂盒及其制备方法

摘要

本发明提供了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA诊断试剂盒，由抗原包被酶标板、样品稀释液、酶工作液、显色剂A液、显色剂B液、终止液、20倍浓缩洗液、阳性对照、阴性对照组成，本发明所述的猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA诊断试剂盒具有高特异性、高灵敏性和高稳定性、高均一性，从而具备优异的综合性能，而且使用过程只需将样品稀释液、待检测样品直接加入到酶标板的微孔内，一步完成，无需预稀释待检测样品，省时省力，并容易区分已加样品与未加样品的微孔，最大限度的减少人为差错。同时，本发明提供的试剂盒制备方法，操作简单，并能保证试剂盒的优异性能。

主权项

一种猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA诊断试剂盒，其特征在于，包括以下组分：(1)抗原包被酶标板：抗原包被酶标板上的微孔内，每孔包被有0.18～0.32μg基因工程猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原；(2)样品稀释液：每100ml样品稀释液包括氯化钠3.1～3.9g，牛血清白蛋白0.7～1.3g，酪蛋白钠0.18～0.30g，硫柳汞钠0.02～0.04g，溴甲酚绿0.001～0.002g，其余为去离子水；(3)酶工作液：每100ml酶工作液包括山羊血清8～16ml，氨基比林0.3～0.6g，硫柳汞钠0.01～0.02g，吐温‑20 0.03～0.06ml，牛血清白蛋白0.2～0.7g，辣根过氧化物酶标记鼠抗猪IgG25～45ul，其余为0.01M、pH为7.2‑7.5的PBS缓冲溶液；(4)显色剂A液：每100ml显色剂A液包括醋酸钠2.1～3.2g，柠檬酸0.28～0.36g，30％双氧水0.04～0.08ml，其余为去离子水；(5)显色剂B液：每100ml显色剂B液包括乙二胺四乙酸二钠0.03～0.06g，柠檬酸0.16～0.23g，甘油8～14ml，四甲基联苯胺0.03～0.06g，其余为去离子水；(6)终止液：每100ml终止液包括浓硫酸10～20ml，其余为去离子水；(7)20倍浓缩洗液：每100ml20倍浓缩洗液包括磷酸氢二钠2.6～3.2g，磷酸二氢钠0.2～0.4g，氯化钠18.5～25.5g，吐温‑20 1.8～2.4ml，其余为去离子水；(8)阳性对照：猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阳性，且猪瘟、猪伪狂犬抗体阴性的猪血清；(9)阴性对照：猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阴性，且猪瘟、猪伪狂犬抗体阴性的猪血清。