发明名称 |
一种检测免疫T细胞和B细胞中常见氨基酸的方法 |
摘要 |
一种检测免疫T细胞和B细胞中常见氨基酸的方法,其属于生物化学分析检测领域。该方法采用各取细胞样品至EP管中,加入内标溶液后,进行脱蛋白处理,得到含有氨基酸的上清液Ⅰ。将上清液Ⅰ按照Waters AccQ•Tag方法衍生化反应,得到衍生化产物Ⅱ,再利用LC/ESI‑Q‑TOF‑MS对衍生化产物Ⅱ进行分析和采集。该方法采用LC/ESI‑Q‑TOF‑MS对免疫细胞内常见氨基酸进行检测,操作简便、灵敏度和专属性高、结果准确,弥补了该领域的空白。 |
申请公布号 |
CN106093226A |
申请公布日期 |
2016.11.09 |
申请号 |
CN201610380843.8 |
申请日期 |
2016.06.01 |
申请人 |
辽宁润生康泰生物医药科技有限公司 |
发明人 |
曹云峰;赵福荣;房中则;高鹏;葛广波;孙晓宇;洪沫;董军;刘明莉 |
分类号 |
G01N30/02(2006.01)I;G01N30/06(2006.01)I;G01N30/08(2006.01)I |
主分类号 |
G01N30/02(2006.01)I |
代理机构 |
大连星海专利事务所 21208 |
代理人 |
杨翠翠 |
主权项 |
一种检测免疫T细胞和B细胞中常见氨基酸的方法,其特征在于步骤如下:(1)免疫T细胞和B细胞中氨基酸样品的制备取细胞样品至EP管中,加入内标溶液后,再加入乙腈、涡旋、离心进行沉淀蛋白处理,得到含有氨基酸的上清液Ⅰ;所述内标溶液为1mM L‑正缬氨酸溶液;(2)样品衍生化反应将上清液Ⅰ按照Waters AccQ•Tag方法衍生化反应,得到衍生化产物Ⅱ;(3)利用LC/ESI‑Q‑TOF‑MS对衍生化产物Ⅱ进行分析和采集液相分析条件为:柱温:50℃,进样室温度:10℃,流速:0.4mL/min,进样体积:5μL,流动相A:含20 mM/L甲酸铵、体积分数0.5%甲酸和体积分数1%乙腈的水,流动相B:含体积分数1.6%甲酸的乙腈,梯度洗脱;质谱条件分析条件为:离子源为ESI,检测器为四级杆串联飞行时间检测器。 |
地址 |
121000 辽宁省锦州市太和区福州街27号 |