一种新型基因工程重组TRAIL融合蛋白及制备方法和用途

摘要

本发明公开了一种利用腺病毒纤维蛋白片段作为三聚体模序与TRAIL融合表达，获得稳定性和活性提高的重组蛋白，作为抗肿瘤治疗药物。还提供融合蛋白表达纯化及活性检测的方法。具体为：第一步；设计并构建融合基因，利用大肠杆菌系统低温诱导表达；第二步：采用镍柱亲和层析的方法纯化目的蛋白，利用凝血酶酶切位点切除His标签，获得最终目的蛋白；第三步：体外检测融合蛋白对肿瘤细胞的杀伤活性和对正常细胞的毒性，第四步：不同条件下检测融合蛋白的稳定性，第五步：裸鼠模型上检测融合蛋白的体内抗肿瘤活性。有益效果：发明了2个腺病毒纤维蛋白片段作为三聚体模序的TRAIL融合蛋白。提供了一种简单，快速的获得高稳定性TRAIL蛋白的方法，可应用于TRAIL蛋白的抗肿瘤研究和应用。解决了TRAIL蛋白稳定性差，活性低的弊端。

主权项

一种新型基因工程重组TRAIL融合蛋白，其特征在于：包含可溶性TRAIL蛋白片段和腺病毒纤维蛋白片段。