发明名称 检测马铃薯S病毒的成套试剂及其在利用数字PCR检测马铃薯S病毒中的应用
摘要 本发明公开了检测马铃薯S病毒的成套试剂及其在利用数字PCR检测马铃薯S病毒中的应用。本发明公开的检测马铃薯S病毒的成套试剂,由名称为X1的引物对和名称为PVS‑p的探针组成;X1由PVS‑f和PVS‑r组成;PVS‑f是序列表中序列1所示的单链DNA;PVS‑r是序列表中序列2所示的单链DNA;PVS‑p的序列为序列表中序列3,PVS‑p的5'端由FAM标记,3'端由TAMRA标记。实验证明,本发明的检测马铃薯S病毒的成套试剂可用于特异性数字PCR,并且特异性好、灵敏度高(灵敏度可达15拷贝/μL),适用于潜隐病症和病毒含量低的样品中PVS的检测。
申请公布号 CN106048099A 申请公布日期 2016.10.26
申请号 CN201610697225.6 申请日期 2016.08.19
申请人 中国检验检疫科学研究院;中华人民共和国吴江出入境检验检疫局 发明人 张永江;黄洁芳;朱鹏宇;付伟;王晨光
分类号 C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I 主分类号 C12Q1/70(2006.01)I
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人 关畅;任凤华
主权项 检测马铃薯S病毒的成套试剂,由名称为X1的引物对和名称为PVS‑p的探针组成;所述X1由PVS‑f和PVS‑r组成;所述PVS‑f是如下a1)至a4)中的任一种单链DNA:a1)序列表中序列1所示的单链DNA;a2)在a1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA;a3)与a1)或a2)限定的单链DNA具有85%以上的同一性的单链DNA;a4)在严格条件下与a1)或a2)限定的单链DNA杂交的单链DNA;所述PVS‑r是如下b1)至b4)中的任一种单链DNA:b1)序列表中序列2所示的单链DNA;b2)在b1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA;b3)与b1)或b2)限定的单链DNA具有85%以上的同一性的单链DNA;b4)在严格条件下与b1)或b2)限定的单链DNA杂交的单链DNA;所述PVS‑p的序列为如下c1)至c4)中的任一种序列:c1)序列表中序列3的序列;c2)在c1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的序列;c3)与c1)或c2)限定的序列具有85%以上的同一性的序列;c4)在严格条件下与c1)或c2)限定的序列杂交的序列。
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