一种同时分析烟叶中铵离子、氨基酸及生物胺的色谱检测方法

摘要

本发明公开了一种同时分析烟叶中铵离子、氨基酸及生物胺的色谱检测方法，包括以下步骤：A、烟叶中铵离子、氨基酸及生物胺的提取；B、烟叶中铵离子、氨基酸及生物胺的衍生化；C、烟叶中铵离子、氨基酸及生物胺的衍生化产物色谱分析。D、烟叶中铵离子、氨基酸及生物胺的定量分析。本发明建立的一种微波辅助提取‑乙氧基亚甲基丙二酸二乙酯衍生‑超高效液相色谱‑紫外检测器同时测定烟草中的铵离子、25种氨基酸与8种生物胺的方法，具有简单、快速、高灵敏度且稳定性好等优点，可以提高样品检测通量与数据准确性。

主权项

一种同时分析烟叶中铵离子、氨基酸及生物胺的色谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：A、烟叶中铵离子、氨基酸及生物胺的提取：称取烤烟粉末或鲜烟叶于离心管中，然后加入两种内标溶液，再加入1.8 mL提取溶液进行微波辅助提取，离心后，上层清液过水系滤膜得滤液；B、烟叶中铵离子、氨基酸及生物胺的衍生化：取步骤A中滤液1 mL于离心管中，加入8.5 μL 3 M氢氧化钠溶液，涡旋后加入1 mL缓冲溶液、0.3 mL有机溶剂与30 μL衍生化试剂，涡旋混匀后进行超声衍生化，反应后加入60 μL 3 M的氢氧化钠溶液，混匀后放入水浴中除去过量的衍生化试剂，反应后冷却，过有机滤膜后于色谱瓶中；C、烟叶中铵离子、氨基酸及生物胺的衍生化产物色谱分析：采用超高效液相色谱‑光电二极管阵列检测器进行色谱分析；D、烟叶中铵离子、氨基酸及生物胺的定量分析：对有标准品的化合物进行绝对定量，对未有标准品的化合物进行相对定量。