CRISPR/Cas9核酸内切酶体系的腺相关病毒载体构建及其用途

摘要

本发明涉及CRISPR/Cas9核酸内切酶体系的腺相关病毒载体构建及其用途。本发明人通过缩小优化Cas9表达元件，制备了具有组织细胞广谱表达的Cas9蛋白的AAV表达载体，首次实现将整个表达元件和Cas9编码序列包装进AAV病毒。基于AAV病毒包装的特性，只需更换包装衣壳质粒，即可将此Cas9载体包装成不同血清型的AAV病毒。本发明获得的病毒可以有效地实现组织靶向表达及DNA编辑。

主权项

一种表达Cas9的重组腺相关病毒载体，其特征在于，该载体包括如下操作性连接的序列元件：5’末端反向重复序列，CMV启动子序列，核定位信号1序列，Cas9编码核酸序列，核定位信号2序列，miniPolyA序列和3’末端反向重复序列。