组织学样品中单个靶标分子的定量

摘要

本发明属于使用免疫化学手段对样品中固定靶标进行可视化和定量的领域。本发明的方法利用允许使样品中的单个靶标单元可视化为明显的点的免疫染色体系。具体地，本发明涉及用于对组织学样品中免疫染色的分子靶标进行可视化和定量的方法和试剂以及所述方法和试剂在医学诊断中的用途。然而本发明的可视化和定量方法可以应用于不同样品中的多种靶标，并且允许对其相对和绝对量进行精确定量。

主权项

一种用于非医学诊断目的的对样品中存在的靶标进行定量的方法，其中所述靶标是固定的，包括(a)将包括所述靶标的单独单元的群体的样品与一种或多种结合剂孵育，其中(i)至少一种所述结合剂能够与所述靶标的单个单独单元特异结合；并且(ii)至少一种所述结合剂包括酶，从而形成具有所述靶标的单个单独单元的预定部分子群的一个或多个离散的单个靶标部位，其中各个离散的单个靶标部位包括所述靶标的一个单独单元与一种或多种结合剂的复合物，其中至少一种结合剂包括所述酶；(b)使包括所述酶的所述离散的单个靶标部位可视化为视觉上明显的点；(c)对所述视觉上明显的点进行定量；(d)评估所述样品中靶标的量，其中步骤(a)包括以下处理之一：(1)将所述样品与第一结合剂孵育，其中所述第一结合剂能够与所述靶标的单个单独单元特异结合并使所述样品中所有结合位点基本上饱和，并且一部分所述第一结合剂包括酶并且所述一部分是预定的；或(2)将所述样品与第一和第二结合剂孵育，其中第一结合剂能够与所述靶标的单个单独单元特异结合并使所述样品中所有结合位点基本上饱和，且第二结合剂能够与所述第一结合剂特异结合，且一部分所述第二结合剂包括酶并且所述一部分是预定的。