一种鼠李糖乳杆菌胞外多糖的提纯方法

摘要

一种鼠李糖乳杆菌胞外多糖的提纯方法，涉及胞外多糖。从保种的MRS固体培养基上选取单菌落接至MRS液体培养基中培养得已活化的发酵液；在MRS液体培养基中添加终浓度为10mM的CaCl₂，取已活化的发酵液进行转接，得转接后的发酵液，取培养0，2，4，6，12，24h的1ml转接后的发酵液测定OD600、pH值；取中转接后的发酵液，除去细胞与蛋白之后，加入冰乙醇，冰箱里过夜，离心，去除上清留沉淀，将沉淀冷冻干燥后取出，透析，再冷冻干燥后即得粗胞外多糖，然后溶解于纯水中，取经过透析冻干后的粗胞外多糖样品溶于蒸馏水中，配制20mg/mL的溶液，离心，取上清液离子柱层析得鼠李糖乳杆菌胞外多糖。

主权项

一种鼠李糖乳杆菌胞外多糖的提纯方法，其特征在于包括以下步骤：1)从保种的MRS固体培养基上选取单菌落接至MRS液体培养基中培养，得已活化的发酵液；2)在MRS液体培养基中添加终浓度为10mM的CaCl₂，取步骤1)中已活化的发酵液进行转接，得转接后的发酵液，取培养0，2，4，6，12，24h的1ml转接后的发酵液测定OD600、pH值；3)取步骤2)中转接后的发酵液，除去细胞与蛋白之后，按体积比1∶3加入冰乙醇，冰箱里过夜，然后离心，去除上清留沉淀，将沉淀冷冻干燥后取出，透析，再冷冻干燥后，即得粗胞外多糖；4)将步骤3)所得的粗胞外多糖溶解于纯水中，取经过透析冻干后的粗胞外多糖样品，溶于蒸馏水中，配制20mg/mL的溶液，离心，取上清液离子柱层析，得鼠李糖乳杆菌胞外多糖。