一种测定血浆中skullcapflavone II浓度的方法

摘要

本发明公开了一种测定血浆中5，2`‑二羟基，6，7，8，5`‑四甲氧基黄酮(skullcapflavone II)浓度的方法，采用液质联用系统测定，先取待测样品，加入一定量的有机溶剂进行药物液液提取，预处理后，经色谱柱分离，用质谱检测器检测，本发明方法快速、准确、灵敏度高、操作简便，适合于测定血浆中skullcapflavone‑II的浓度。

主权项

一种测定血浆中skullcapflavone II浓度的方法，其特征在于，血浆样品经预处理后经液质联用系统检测其浓度，具体方法包括如下步骤：(1)血浆样品预处理：取血浆样品，加入内标新补骨脂异黄酮，加入一定量的乙酸乙酯进行有机溶剂萃取，取上清液氮气吹干后，用流动相溶解得到预处理后的血浆样品；(2)将步骤(1)预处理后的血浆样品进行液相色谱分离：色谱条件中，色谱柱为Agilent ZORBAX SB‑C₁₈柱；流动相为体积比为80∶20的乙腈与水；流速为0.2‑0.5mL·min^‑1；柱温为40℃；洗脱方式为等度洗脱；(3)质谱测定，条件为：离子源：电喷雾离子化电离源ESI；离子检测方式：多反应监测MRM；离子极性：正离子；skullcapflavone‑II碰撞电压23eV；内标新补骨脂异黄酮碰撞电压29eV；毛细管电压4.5kV；气帘气Curtain gas：20psi；离子源Gas1：70psi；离子源Gas2：80psi；脱溶剂温度：400℃；CXP：9V；CAD：10V；DP：100V；EP：10V，检测对象的离子通道：skullcapflavone‑II m/z 375.1→345.1，内标新补骨脂异黄酮m/z 323.3→255.1(4)计算：采用内标法，以skullcapflavone‑II和内标新补骨脂异黄酮的峰面积比值代入标准曲线方程计算skullcapflavone‑II的浓度。