三七不定根的诱导及组织培养方法

摘要

本发明公开了一种三七不定根的诱导及组织培养方法，包括以下步骤:(1)三七不定根的诱导：取三七的愈伤组织，接种于固体培养基上，在无菌、23‑25℃及避光的条件下培养3‑5周，得到带有愈伤组织的三七不定根；(2)三七不定根的继代培养:将带有愈伤组织的三七不定根转接到液体培养基中，在转速为110‑130r·min^‑1的摇床上，在无菌、23‑25℃及光照条件下连续培养4‑5周；继代3‑5次。本发明利用组织培养方法培养三七不定根，其生长速率快，并且其活性次级代谢产物的含量高且比较稳定，培养物较均一，同时，培养条件在人工控制下不受外界多变天气及病虫害的影响。工艺过程简单，成本低廉，诱导率高，重复性好。

主权项

一种三七不定根的诱导及组织培养方法，其特征在于包括以下步骤:三七不定根的诱导：取三七的愈伤组织，接种于固体培养基上，在无菌、23‑25℃及避光的条件下培养3‑5周，得到带有愈伤组织的三七不定根；三七不定根的继代培养:将带有愈伤组织的三七不定根转接到液体培养基中，在转速为110‑130r·min^‑1的摇床上，在无菌、23‑25℃及光照条件下连续培养4‑5周；继代3‑5次；所述固体培养基为在SH培养基中加入吲哚丁酸、萘乙酸、蔗糖和琼脂，使吲哚丁酸的终浓度为3.0‑5.0mg/L、萘乙酸的终浓度为0.5‑1.0mg/L、蔗糖的终浓度为30‑40g/L、琼脂的终浓度为6‑7g/L，pH＝5.8‑6.0；所述液体培养基为在SH培养基中加入吲哚丁酸、萘乙酸和蔗糖，使吲哚丁酸的终浓度为3.0‑5.0mg/L、萘乙酸的终浓度为0.5‑1.0mg/L、蔗糖的终浓度为30‑40g/L，pH＝5.8‑6.0；所述SH培养基配方为NH₄H₂PO₄终浓度300mg/L，MgSO₄终浓度195.4mg/L,CaCl₂终浓度151mg/L,KNO₃终浓度2500mg/L,FeSO₄·7H₂O终浓度15mg/L,Na₂EDTA·2H₂O终浓度20mg/L,CuSO₄·5H₂O终浓度0.2mg/L,ZnSO₄·7H₂O终浓度1mg/L,KI终浓度1mg/L,MnSO₄·H₂O终浓度10mg/L,CoCl₂·6H₂O终浓度0.1mg/L,H₃BO₃终浓度5mg/L,NaMoO₄·2H₂O终浓度0.1mg/L,蔗糖终浓度10g/L，pH 5.8‑6.0。