发明名称 一种低温提取大分子胶原蛋白的方法
摘要 本发明公开了一种低温提取大分子胶原蛋白的方法,包括以下步骤:(1)猪皮备用;(2)除杂蛋白;(3)脱脂;(4)脱脂后溶胀;(5)溶胀后初步冻结,打浆破碎,提取,过滤,得提取液和滤渣;(6)加氯化钠进行盐析沉淀,冷冻干燥制得大分子胶原蛋白粗品;(7)将大分子胶原蛋白粗品溶解、调pH值、低温静置,取胶原蛋白悬浮层;(8)溶解、调pH值、低温静置,取胶原蛋白悬浮层;(9)溶解、透析、冷冻干燥,得大分子胶原蛋白精品。本发明减少提取的时间,降低提取过程的能耗,简化了工艺过程,既降低了工艺的操作难度,又节约了生产成本,提取得到的大分子胶原蛋白质量好。
申请公布号 CN105985430A 申请公布日期 2016.10.05
申请号 CN201610052925.X 申请日期 2016.01.27
申请人 成都市科乐生物技术有限公司 发明人 杨东
分类号 C07K14/78(2006.01)I;C07K1/30(2006.01)I 主分类号 C07K14/78(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种低温提取大分子胶原蛋白的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)选用新鲜的猪皮,清除猪皮上的猪毛及杂质,用自来水洗净后沥干,切成 1×1cm 的碎片,切成的碎片于 75%乙醇中浸泡10‑15min,取出用4‑5°C的去离子水浸泡冲洗3~5次后沥干备用;(2)除杂蛋白:杂蛋白的去除采用氢氧化钠溶液浸泡,氢氧化钠溶液的浓度为 0.6mol/L,浸泡时间20‑30小时,浸泡温度4‑5℃,在浸泡过程中,不断搅拌,每隔5小时,更换氢氧化钠溶液1次 ;(3)脱脂:采用碳酸钠和去离子水4℃搅拌3‑6h,排水,加去离子水4°C清洗,脱除脂肪;(4)脱脂后按照 1∶30的比例加入醋酸溶液进行溶胀,醋酸溶液的浓度为0.6mol/L,溶胀温度为 4℃,溶胀时间为 24‑36小时;(5)溶胀后初步冻结,冻结温度为 ‑25℃,冻结时间为 4小时 ;冻结后原料加入适量浓度为 0.5mol/L 的醋酸溶液,4℃下进行打浆破碎 0.5分钟,打浆后颗粒大小在 2mm以内,打浆及环境温度为 4℃ ;然后向其中加入 0.5mol/L 的醋酸溶液进行一次提取36小时,原料与醋酸溶液的重量体积比为 1∶20,提取完毕后,以40‑50目纱网过滤,得提取液和滤渣;(6)向提取液中加入氯化钠至浓度为2.5mol/L 进行盐析沉淀,冷冻干燥制得大分子胶原蛋白粗品;(7)在制得的大分子胶原蛋白粗品中加入0℃ ‑4℃的醋酸进行溶解,得溶解液,大分子胶原蛋白粗品与酸性溶液的重量体积比为1∶40;向溶解液或酸性提取液中加入0℃ ‑4℃、浓度为2.0mol/L的氢氧化钠溶液,将其pH值调节到6‑11,得胶原蛋白溶液;将胶原蛋白溶液在0℃‑4℃静置24小时后,取出胶原蛋白溶液上部凝聚的胶原蛋白悬浮层;(8)将胶原蛋白悬浮层溶解于0℃ ‑4℃的醋酸中,胶原蛋白悬浮层与酸性溶液的重量体积比为1∶20,向溶解液或酸性提取液中加入0℃ ‑4℃、浓度为2.0mol/L的氢氧化钠溶液,将其pH值调节到6‑11,得胶原蛋白溶液;将胶原蛋白溶液在0℃‑4℃静置24小时后,取出胶原蛋白溶液上部凝聚的胶原蛋白悬浮层;(9)取步骤(8)的胶原蛋白悬浮层用 0.05‑10mol/L的醋酸溶液溶解,胶原蛋白悬浮层与醋酸溶液的重量体积比为1∶10,然后用蒸馏水直接透析,透析后将得到的胶原蛋白悬浮液冷冻干燥,得大分子胶原蛋白精品。
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